即噬菌体展示肽库方法。我们以ApoCaM为靶蛋白进行了四轮噬菌体展示肽库筛选，并对得到的亲和力较强的单斑进行了ELISA检验，验证其与ApoCaM的亲和能力。挑选结合能力较强的提取噬菌体单链DNA，测序后得到四条ApoCaM亲和小肽序列。对于得到的小肽序列进行基序分析，并未得到共同基序，但是经过在NCBI中BLAST后，在序列相似的蛋白中找到一些目前已知的人源蛋白。这些蛋白包括了普列克底物蛋白（Pleckstrin）、Neruon Plexin蛋白等，有研究表明它们能够和钙调蛋白相互作用，但具体作用机制并不清楚。同时，序列在Ca2+-CaM结合能力比对的网站中并未发现作用力，提示这种作用力可能是一种新的作用方式。为了研究这种亲和作用，本实验采用了核磁共振（NMR）的方法。NMR是目前研究蛋白质结构最具有说服力的手段之一。本论文使用固相肽合成法合成三条ApoCaM亲和小肽，并经过HPLC分析和制备得到纯化的多肽，经过质谱分析后与理论预测分子量吻合，同时，用15N标记ApoCaM。NMR实验分成两组，一组是加入亲和短肽的ApoCaM，另一组不加亲和短肽作为对比。经过1H-15N HSQC的NMR实验，得到2D-NMR谱图。通过对比谱图找出两组之间发生位移变化较大的氨基酸位点。发生显著变化的位点包括了了GLY98、ILE¹⁰⁰、ASN¹³⁷、ASP64、LEU¹¹⁶、ILE¹³⁰、ALA⁵⁷，并对相关点的位移程度进行了衡量。综上，本论文通过噬菌体展示肽库筛选得到了ApoCaM的亲和小肽，并对亲和小肽和蛋白之间的作用进行了NMR检测，发现若干位点发生了明显的位移，证明ApoCaM和亲和小肽发生作用后有了结构变化，这一结果对ApoCaM与下游靶蛋白的作用及其结合模式给出合理的解释，为研究不依赖钙的人源钙调蛋白在细胞中的生理功能打下了基础。