放射性粒子125I平面模型对肺癌A549细胞的损伤研究

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目的:研究125I放射性粒子对离体肺癌A549细胞的损伤作用,比较不同距离125I放射性粒子对肺癌A549细胞损伤程度,比较不同衰减状态下125I放射性粒子都肺癌A549细胞损伤效应的变化。为临床放射性粒子125I近距离治疗肺癌提供更精准的放射剂量依据。方法:制作简易5粒125I粒子的离体辐射粒子模型,使用35mm基板,在基板中心及上下左右各1cm距离处包埋125I粒子。取生长状态良好的肺癌A549细胞均匀种植在96孔板相应区域,将96孔板平行放置在放射平面上下,根据距离不同分为5mm、10mm且设置空白对照组,合适培养条件下,连续近距离辐照48h,去除辐照条件继续培养24h,MTT比色法检测细胞存活率。取生长状态良好的肺癌A549细胞均匀种植在35mm培养皿中,将35mm培养皿平行放置在放射平面上下,实验组根据距离不同分为5mm、10mm并设置空白对照,合适培养条件下连续近距离辐照48h,去除辐照条件继续培养24h,流式细胞仪检测细胞凋亡及凋亡周期。取生长状态良好的肺癌A549细胞均匀种植35mm培养皿中,培养皿中加入无菌盖玻片,使其贴壁生长,实验组根据距离不同分为5mm、10mm,空白对照,合适培养条件中近距离持续辐照48h天,去除辐照条件培养24h天,显微镜及免疫荧光显微镜,观察细胞形态学变化及免疫荧光情况。结果:MTT比色法及流式细胞仪结果显示;离体125I粒子平面对实验组A549细胞具明显损伤作用(P<0.05)有统计学意义。组内比较发现,125I粒子平面对实验组A549细胞凋亡程度与距离呈正比,5mm距离组细胞凋亡程度重,其次是10mm距离组(P<0.05)有统计学意义。流式细胞仪细胞周期检测结果;放射性粒子平面对A549细胞阻滞作用集中在S、G2及M期(P<0.05)有统计学意义。流式细胞仪检测细胞损伤结果;离体125I粒子平面对实验组细胞损伤以细胞凋亡作用为主(早期凋亡)(P<0.05)有统计学意义。MTT及流式细胞仪组间实验结果显示;A549细胞损伤与粒子衰减呈反比关系,早期粒子辐照导致的细胞损伤作用强于中晚期(P<0.05)有统计学意义。HE染色;实验组能见损伤细胞中出现凋亡细胞(内含凋亡小体),正常组未见明显凋亡细胞。免疫荧光染色;实验组见部分细胞荧光绿染及红染,对照组未见细胞荧光绿染及红染。结论:5粒125I放射性粒子模型对肺癌A549细胞具有损伤作用,距离越近,损伤越重。125I放射性粒子活度(衰减状态)对肺癌A549细胞损伤有影响,早期活度越高,损伤越重。125I放射性粒子将A549细胞阻滞在S、G2和M期。125I放射性粒子导致A549细胞损伤以细胞凋亡为主。
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