【摘 要】
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目的:研究ECEL1基因对肝癌细胞增殖的影响,为肝癌防治提供新的靶点。方法:(1)人肝癌细胞感染ECEL1基因RNAi慢病毒,同时设置对照组,然后在荧光显微镜观察细胞感染效率。(2)qPCR检测ECEL1基因敲减后的?肝癌细胞中mRNA的表达情况。(3)Western Blot内源验证?肝癌细胞中ECEL1基因表达情况。(4)应用克隆形成测定细胞增殖,Celigo检测并记录各组肝癌细胞在各时间点的
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目的:研究ECEL1基因对肝癌细胞增殖的影响,为肝癌防治提供新的靶点。方法:(1)人肝癌细胞感染ECEL1基因RNAi慢病毒,同时设置对照组,然后在荧光显微镜观察细胞感染效率。(2)qPCR检测ECEL1基因敲减后的?肝癌细胞中mRNA的表达情况。(3)Western Blot内源验证?肝癌细胞中ECEL1基因表达情况。(4)应用克隆形成测定细胞增殖,Celigo检测并记录各组肝癌细胞在各时间点的细胞数目,进而分析细胞的生长增殖状况;同时MTT检测细胞增殖。结果:(1)BEL-7404细胞及Huh-7细胞感染ECEL1基因RNAi慢病毒,建立对照组,结果表明,细胞感染效率均超过80%,细胞状态正常。(2)qPCR检测BEL-7404细胞及Huh-7细胞的实验组ECEL1基因mRNA的表达水平明显受到抑制(p<0.05),敲减效率分别为70.5%、60.7%。(4)WB检测结果示:相对于对照组,实验组BEL-7404细胞及Huh-7细胞ECEL1基因蛋白质表达明显下降(p<0.05)。(5)克隆形成、Celigo及MTT检测结果示:相对于对照组,实验组的BEL-7404细胞及Huh-7细胞增殖明显受到抑制;结论:ECEL1基因敲减对人肝癌细胞的增殖具有抑制作用.
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