目的:研究Deguelin对于前列腺癌细胞株PC3和DU145是否具有抑制生长和诱导凋亡作用。验证Deguelin是否对于TXT(泰素帝)及MIT(米托蒽醌)具有化疗增敏作用。探讨Deguelin在PC3和DU145细胞中可能的作用机制，希望为晚期前列腺癌患者提供一种新的治疗选择。 方法: CCK-8法进行细胞毒性试验，绘制细胞生长抑制曲线。为了评价Deguelin与TXT及MIT的联合作用效果，根据金氏公式计算q值，q=E(AB)/[EA+(1-EA)×EB]。其中E(AB)为两药合用的抑制率，EA和EB为两药单用的抑制率。q>1.15表示两药有协同作用，q=0.85～1.15表示两药作用相加， q<0.85表示两药互相拮抗。通过流式细胞术PI染色检测用药前后细胞周期变化。采用流式细胞术Annexin v和PI双染法检测细胞凋亡。Western-blot检测Akt、MAPK及其磷酸化蛋白表达，探讨药物作用机制。 结果: 1．细胞毒试验：10nmol/l-1μmol/l Deguelin对前列腺癌细胞株PC3的生长均有抑制作用，呈现明显的时间、浓度依赖性。与阳性对照Wortmanin(渥曼青霉素)相比，同样为100nmol/l的Deguelin对PC3细胞的抑制作用更为明显(P<0.01)。不同浓度的Deguelin和Wortmanin对DU145细胞均未见明显的生长抑制作用。在PC3细胞中联合应用Deguelin和TXT及Deguelin和MIT较单药对细胞生长的抑制作用明显增强(P<0.01)。Deguelin和TXT联合应用时q值为1.173，两药有协同作用。Deguelin和MIT联用时的q值为1.002，为叠加作用。在DU145细胞中Deguelin/TXT及Deguelin/MIT联合应用与单药时细胞存活率无明显改变(P>0.05)，q值分别为0.936和0.907，说明其联合应用时均表现为叠加作用。 2．细胞周期检测：Deguelin作用48小时后，PC3细胞呈现出明显的G2/M期阻滞现象，并且随着药物浓度的提高，阻滞于G2/M期的细胞比例相应的上升。TXT10nmol/l作用48小时后，PC3细胞也呈现出明显的G2/M期阻滞现象。Deguelin100nmol/l与TXT10nmol/l联合作用48小时后则出现了明显的S期阻滞现象。DU45细胞中Deguelin作用48小时后并未明显改变细胞周期的分布。 3．细胞凋亡检测：PC3细胞中，不同浓度的Deguelin作用72小时后均可引起凋亡，并且呈浓度依赖性。与Wortmanin相比，同样为100 nmol/l的Deguelin引起PC3细胞凋亡率要高于前者。PC3细胞中，TXT和MIT与Deguelin联合用药后的凋亡率明显高于单独用药组(P<0.01)。在DU145细胞中，Wortmanin及Deguelin作用72小时后并未明显改变细胞凋亡率，TXT单独应用及与Deguelin联合应用的凋亡率也无统计学差别。 4．Western blot检测蛋白的表达：在PC3及DU145细胞中，总AKT蛋白、p42/44MAPK及其磷酸化蛋白在药物作用前后的表达水平未见差别。PC3细胞中pAKT蛋白呈现持续高表达状态，其表达在Wortmanin100nmol/l及Deguelin100nmol/l作用48小时后明显降低，其中Deguelin组降低更加明显。而DU145细胞用IGF-1刺激前几乎未见pAKT蛋白的表达，在用IGF-1刺激15分钟后出现较低水平的pAKT蛋白表达，此作用几乎完全被Deguelin所阻断。 结论: Deguelin能够抑制前列腺癌细胞株PC3增殖，呈现时间、浓度依赖性，对DU145细胞则无此作用。Deguelin使PC3细胞阻滞于G2/M期进而诱导其发生凋亡，对DU145细胞株则无此作用。在PC3细胞中，Deguelin对化疗药物TXT及MIT有化疗增敏作用，联合应用时明显提高细胞生长抑制率和凋亡率，对DUl45细胞株则无此作用。Deguelin是通过抑制PI3K/AKT。而非MAPK通路实现抑制细胞增殖、诱导凋亡和化疗增敏作用的。两株细胞间试验结果的差异是因为其pAKT表达水平的差异造成的。