成骨蛋白-1延缓髓核抽吸术后椎间盘退变的实验研究

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目的:建立兔腰椎间盘纤维环后外侧穿刺抽吸髓核导致椎间盘退变的动物模型,观察细胞生长因子OP-1(Osteogenic Protein-1,成骨蛋白-1)对髓核抽吸术后椎间盘退变的影响。方法:(1) 8只日本大耳白兔,用21号针头行腰3/4椎间盘后外侧穿刺抽吸出部分髓核组织,术后8周时拍摄腰椎侧位X线测量施术椎间隙高度,计算椎间盘高度指数(Disc Height Index,DHI),并行正中矢状位MRI检查,观察T2加权信号强度,处死兔子迅速取材,椎间盘组织行Masson染色,观察椎间盘退变情况;(2) 32只日本大耳白兔随机分成2周、4周、8周、12周4组,所有兔子用21号针头行腰3/4椎间盘后外侧穿刺抽吸出部分髓核组织,用微量注射器注射OP-1 25μL作为实验组椎间盘(OP-1组),行腰1/2椎间盘穿刺抽吸部分髓核组织并注射25μL生理盐水作为对照椎间盘(Saline组),术后2周、4周、8周、12周时按照分组取8只兔子行腰椎侧位X线检查,测量施术椎间隙高度并计算DHI,行正中矢状位MRI检查,观察T2加权信号强度改变;检查完后处死兔子迅速取材,行椎间盘组织病理学检查,观察椎间盘退变情况;结果:(1)模型组椎间盘术后8周时X线检查结果示髓核抽吸术后椎间盘高度明显降低,正中矢状位MRI检查结果示施术椎间盘T2加权信号强度明显降低,病理检查结果示髓核组织裂隙形成,胶原排列极其紊乱,部分组织玻璃样改变,类软骨细胞较多,出现介于类软骨细胞和纤维细胞之间的细胞,纤维环结构紊乱,与髓核分界模糊,胶原纤维极度扭曲,部分断裂;髓核抽吸术后8周时椎间盘处于明显退变状态。(2) X线检查结果示:OP-1组及Saline组术后2周,4周、8周、12周椎间盘高度呈降低趋势,但OP-1组高度降低较Saline组高度降低缓慢,各时间点两组椎间盘DHI%差异显著(p<0.05);MRI检查结果示:OP-1组椎间盘术后2周、4周、8周、12周的髓核信号强度均较同期的Saline组椎间盘髓核信号强度高,二者Thompson评分结果差异显著(p<0.05);病理检查结果示:Saline组椎间盘术后凝胶状髓核组织随时间逐渐出现裂隙,形态逐渐紊乱,12周时呈现明显的纤维化表现,髓核4周时出现较多的类软骨细胞,呈现活跃状态,髓核细胞明显减少,术后8、12周髓核内纤维样细胞增多,类软骨细胞数量减少,纤维环随时间逐渐出现扭曲,排列紊乱,突起,出现分层、纤维断裂现象;OP-1组椎间盘术后髓核内类软骨细胞的出现较迟,8周时类软骨细胞数量较多,呈现活跃状态,12周时仍保持较多的数量,纤维细胞数量较少,纤维环组织2周时尚保持较完整的纤维环形态,内层胶原纤维轻度扭曲,4周开始出现纤维环向内突起及分层现象,8周时内层纤维环与髓核分界处开始变得模糊,内层纤维环扭曲、突起,外层纤维出现轻微扭曲(?)12周时全层纤维环胶原纤维紊乱,但纤维断裂及分层裂隙现象轻微,外层纤维环仍完整,纤维环无巨大裂隙出现。结论:(1)椎间盘后外侧纤维环穿刺髓核抽吸术可导致兔椎间盘退变。(2) OP-1能延缓后外侧纤维环穿刺髓核抽吸术后兔椎间盘的退变。
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