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目的:1.观察小鼠肝脏特异性Brahma相关基因1（Brahma-related gene1,Brg1）缺失对肝再生（Liver Regeneration,LR）的影响。2.研究mi R-187-5p在Brg1调控LR过程中的作用。3.探讨Brg1及mi R-187-5p与Hippo信号通路的联系,并初步阐明Brg1调控LR过程中的机制。方法:1.将Brg1 lox P/lox P小鼠与albumin-Cre小鼠交配,选择性地敲除肝细胞中的Brg1。用蛋白质印迹法（Western Blot,WB）检测肝脏特异性Brg1缺失(Brg1-/-)小鼠（KO组）肝组织样本中Brg1蛋白的表达,以验证Brg1基因敲除率;检测KO组小鼠肝体重比及肝功（ALT、AST）与正常C57BL/6小鼠（WT组）相比有无差别,并用HE染色及Ki-67免疫组化分别检测KO小鼠肝脏与WT小鼠相比有无病理学及肝细胞增殖情况改变。对8周龄雄性KO组小鼠及其同周龄、性别的WT组小鼠进行了2/3部分肝切除术（Partial hepatectomy,Ph）。在术后0h、24h、36h、48h、72h和168h（7d）采集小鼠肝脏组织样本并观察小鼠肝脏再生情况,并用免疫组化检测两组样本中反应肝细胞增殖指标（Ki-67及Brd U阳性细胞率）的情况。2.利用Target Scan和mi RWalk两个在线数据库对Brg1及Hippo信号通路中关键调控激酶LATS1的潜在靶mi RNA进行相关性预测分析,并用定量实时聚合酶链反应（RT-q PCR）对样本中目标mi RNA的表达进行验证。根据验证结果进行回复实验:对Brg1缺失小鼠(Brg1-/-)小鼠（KO组）注射相应外源性mi RNA功能模拟物（agomir）,并将其与同周龄、同性别的C57BL/6小鼠（WT组）上进行了2/3Ph。在术后0h、24h、36h、48h、72h和168h（7d）采集小鼠肝脏组织样本,观察小鼠肝脏再生情况,用免疫组化检测两组样本中反应肝细胞增殖指标（Ki-67和Brd U阳性细胞率）的情况。3.用WB法检查KO组和WT组小鼠肝脏组织样本中周期蛋白（Cyclin D1、Cyclin A和Cyclin E1）、周期蛋白激酶CDKs、Hippo信号通路中关键调控激酶LATS1及下游蛋白YAP表达情况,探讨Brg1及mi R-187-5p与Hippo信号通路的联系,并初步阐明Brg1调控LR过程中的机制,以及mi R-187-5p模似物回输后对上述细胞周期蛋白、周期蛋白激酶和LATS1及YAP的影响。4.本实验所有数据采用SPSS 22.0统计分析软件进行统计分析,结果用均数±标准差（M±SD）表示,以P＜0.05或P＜0.01表示差异有统计学意义。结果:1.小鼠胚胎中肝细胞特异性Brg1缺失并未导致胚胎的死亡。KO组小鼠肝细胞中Brg1蛋白的表达值为（0.22±0.04）,与WT组小鼠的（0.81±0.04）相比表达显著降低（P＜0.01）。KO组小鼠与WT小鼠相比较,肝脏没有明显病理学改变。术前KO小鼠与WT小鼠相比,肝体重比（4.4%vs 4.3%）、ALT（71.3U/L vs 76.0U/L）和AST（282.0U/L vs 290.0U/L）均无明显差异（P＞0.05）。Ph术后早期（36h、48h和72h）,KO小鼠肝组织再生情况（肝体重比:2.48%、2.78%和2.77%）显著低于WT组（2.96%、3.26%和3.27%）（P＜0.01）;36h-48h时,KO组小鼠肝细胞Ki-67阳性细胞比率（17.67%和16.34%）也显著低于WT组（69.23%和57.07%）（P＜0.01）。两组Brd U阳性细胞率也与Ki-67结果相似。以上结果表明肝脏特异性Brg1敲除不会导致小鼠死亡,但会造成小鼠Ph后早期肝再生的延迟。2.Target Scan和mi RWalk在线数据库对mi RNA的相关性进行了预测性分析,结果提示mi R-187-5p对Hippo信号通路中关键激酶LATS1存在潜在调控作用,且与WT组mi R-187-5p的表达（1.33）相比较,KO组中mi R-187-5p的表达显著降低（0.34）（P＜0.01）。通过荧光素酶报告实验,我们证明mi R-187-5p可以直接结合LATS1。Ph术后早期（36h、48h和72h）,与WT组肝体重比（2.87%、3.50%和3.43%）相比,注射相应外源性mi R-187-5p功能模拟物agomir的KO组小鼠肝体重比（2.53%、3.18%和3.41%）无统计学差异（P＞0.05）,表明补充外源性mi R-187-5p后在Ph术后早期恢复了Brg1敲除造成的肝组织再生延迟现象。术后36h和48h时,KO小鼠肝细胞的增殖情况（Ki-67阳性细胞比率分别为71.33%和65.50%）与同时期WT组（73.33%和67.53%）相比无统计学差异（P＞0.05）。两组Brd U阳性细胞率也与Ki-67结果相似。以上结果表明Brg1可以正向调控mi R-187-5p的表达,促进Ph后早期肝再生。3.Ph后36h和48h,KO组小鼠肝细胞中的细胞周期蛋白激酶CDK1的表达量（0.20和0.13）显著低于WT小鼠（0.69和0.74）（P＜0.05）。Ph后0h、24h、36h和48h时,细胞周期蛋白cyclin D1的表达量（0.01、0.23、0.20和0.26）低于WT小鼠（0.17、0.31、0.83和0.71）（P＜0.05）。Ph后36h和48h,LATS1在KO组小鼠肝脏中表达量（0.83和0.70）显著高于WT组（0.60和0.36）,而同时间点KO组去磷酸化的YAP表达量显著低于WT组（0.30和0.35 vs 0.43和0.64）（P＜0.05）。输注外源性mi R-187-5p agomir后,KO组小鼠与WT组小鼠在0h-72h中cyclin D1、CDK1、LATS1和去磷酸化的YAP的表达量的统计学差异几乎被消除（P＞0.05）。以上结果表明mi R-187-5p模似物回输后能恢复因Brg1基因缺失所致的上述细胞周期蛋白、周期蛋白激酶和Hippo信号通路关键调控激酶、蛋白的表达。因此,Brg1可能通过mi R-187-5p抑制Hippo信号通路并促进小鼠肝再生。结论:1.肝脏特异性Brg1敲除不会导致小鼠胚胎死亡或引起其他病理学改变,但会造成小鼠Ph后早期肝再生的延迟。2.Brg1可以正向调控mi R-187-5p的表达,补充外源性mi R-187-5p能恢复小鼠由于肝脏特异性Brg1敲除造成的Ph后早期肝再生的延迟。3.Brg1可能通过mi R-187-5p抑制Hippo信号通路正向调控小鼠肝再生。