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本文以高产聚γ-谷氨酸耐盐地衣芽胞杆菌WX-02 (Bacillus licheniformisWX-02)为研究对象,建立B. licheniformis WX-02代谢样品前处理方法,同时研究通过多种环境因素方法对B. licheniformis WX-02生物合成γ-PGA的影响。其主要研究结果如下：(1)建立HPLC检测B. licheniformis WX-02胞内核苷酸条件：根据能量物质(ATP、ADP和AMP)理化性质以及B. licheniformis WX-02代谢物种类、含量等因素,优化HPLC相关参数：流动相：0.1mol/L磷酸盐缓冲液(pH 6.25),5%甲醇,15 mmol/L甲酸；采用等度洗脱,流速：1 mL/min;检测波长：254 nm；进样量：15μL；柱温：35℃。试验结果表明,ATP、ADP和AMP能量物质精密度可获得较好的重复性,三者相对标准偏差(RSD)分别在0.70%、0.90%和0.28%以下；测得平均回收率ATP 110%,ADP 102%,AMP 100%。(2)建立B. licheniformis WX-02样品前处理方法：优化淬灭剂、淬灭时间、压力破碎条件等样品制备程序,其主要优化参数结果为：淬灭剂60%MeOH/70 mmol/L HEPES,淬灭时间30 min,破碎压力2000 bar。其核苷酸总量为0.6317μmol/g,能荷值为0.93。(3)环境因素对B. licheniformis WX-02生物合成γ-PGA的影响：研究B.licheniformis WX-02在多种环境因子胁迫下(冷、乙醇、H202、乙酸钠、超声波)对γ-PGA发酵的影响。结果表明超声波和乙酸钠处理能提高γ-PGA产量。在优化的乙酸钠处理条件(发酵0h,向培养基中添加0.6%的乙酸钠),超声波处理条件(120 W,40 kHZ),与对照相比,y-PGA产量分别提高112.7%和96.2%。本研究发现超声波和乙酸钠处理能提高B. licheniformis WX-02生物合成γ-PGA产量,由于其成本低且简单易行,因此本方法有望应用于B.licheniformis WX-02发酵y-PGA的工业化生产中。