地衣芽胞杆菌代谢组学样品制备方法的建立及环境因素对其生物合成γ-PGA的影响

来源 :华中农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lilanlan999
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本文以高产聚γ-谷氨酸耐盐地衣芽胞杆菌WX-02 (Bacillus licheniformisWX-02)为研究对象,建立B. licheniformis WX-02代谢样品前处理方法,同时研究通过多种环境因素方法对B. licheniformis WX-02生物合成γ-PGA的影响。其主要研究结果如下:(1)建立HPLC检测B. licheniformis WX-02胞内核苷酸条件:根据能量物质(ATP、ADP和AMP)理化性质以及B. licheniformis WX-02代谢物种类、含量等因素,优化HPLC相关参数:流动相:0.1mol/L磷酸盐缓冲液(pH 6.25),5%甲醇,15 mmol/L甲酸;采用等度洗脱,流速:1 mL/min;检测波长:254 nm;进样量:15μL;柱温:35℃。试验结果表明,ATP、ADP和AMP能量物质精密度可获得较好的重复性,三者相对标准偏差(RSD)分别在0.70%、0.90%和0.28%以下;测得平均回收率ATP 110%,ADP 102%,AMP 100%。(2)建立B. licheniformis WX-02样品前处理方法:优化淬灭剂、淬灭时间、压力破碎条件等样品制备程序,其主要优化参数结果为:淬灭剂60%MeOH/70 mmol/L HEPES,淬灭时间30 min,破碎压力2000 bar。其核苷酸总量为0.6317μmol/g,能荷值为0.93。(3)环境因素对B. licheniformis WX-02生物合成γ-PGA的影响:研究B.licheniformis WX-02在多种环境因子胁迫下(冷、乙醇、H202、乙酸钠、超声波)对γ-PGA发酵的影响。结果表明超声波和乙酸钠处理能提高γ-PGA产量。在优化的乙酸钠处理条件(发酵0h,向培养基中添加0.6%的乙酸钠),超声波处理条件(120 W,40 kHZ),与对照相比,y-PGA产量分别提高112.7%和96.2%。本研究发现超声波和乙酸钠处理能提高B. licheniformis WX-02生物合成γ-PGA产量,由于其成本低且简单易行,因此本方法有望应用于B.licheniformis WX-02发酵y-PGA的工业化生产中。
其他文献
食管狭窄为常见的消化类疾病,其中复杂性食管狭窄的患病比例逐年上升。支架置入术作为有效治疗手段已经成功应用于多数食管狭窄,但置入后不良反应限制了食管支架在治疗复杂性
根据奥林匹克精神的内涵,结合北京奥运会举办理念,探讨哈尔滨申办冬季奥林匹克运动会的申办理念制定的依据;提出了以申办冬奥会为契机,宣传自身优秀文化,改善城市建设发展方向,完善
目的总结食管覆膜内支架置入治疗自发性食管破裂的临床经验。方法局部黏膜麻醉、透视下置入经鼻胸腔引流管、食管覆膜内支架与空肠营养管治疗自发性食管破裂24例。术后脓腔灌
随着网络时代的到来,人们阅读心理的变化、出版市场的成熟与信息技术的发展为高校学报网络出版提供了前提条件。学报网络出版主要有传统学报上网和网络版学报两种方式,它们具
由于主客观因素的影响,相当多的大学生存在道德失范问题.本文列举了当代大学生道德失范的主要表现,并从心理层面进行了归因分析.大学生正处在品德形成的重要时期,同时也是心
目的探讨125I粒子植入治疗骨转移瘤患者的有效性和安全性。方法将骨转移瘤患者54例分为两组,其中行125I粒子植入的30例患者为治疗组,植入粒子总数1581粒,平均每例植入(52&#17
今天,全球领先的啤酒酿造商百威英博携手《南方周末》、中国青少年发展基金会以及中国酒业协会啤酒分会,共同在北京启动名为"Hi,酒——家庭对话之未成年人饮酒问题"的主题活动,
肥胖是一个重要的公共健康问题,与26种疾病具有因果关系。胃左动脉栓塞减肥,作为一种新兴的介入微创减肥方式,能够减少胃底部ghrelin激素的分泌,在动物模型中验证了其有效性