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中国水仙(Narcissus tazetta Lin.var.chinensis Roem)为石蒜科水仙属植物,多年生草本,是多花水仙的一个变种。福建漳州是中国水仙主要产地之一。漳州水仙具有浓郁的香味,深受人们的喜爱。目前,一些高档的观赏植物因缺少香味,不能完全满足市场需求,本实验对花香基因克隆的研究具有重大的意义。本研究以漳州水仙品种‘金盏银台’为材料,采用RT-PCR和RACE技术,克隆得出了中国水仙DXPS、DXR的cDNA全长序列和PALcDNA片段序列,为下一步利用花香基因进行遗传转化奠定基础,为缺少香味的植物遗传改良提供了可能。主要研究结果如下:1、克隆得到甲基赤藓糖醇(methylerythritol)合成途径中的关键基因DXPS(登录号为:GU574804)的cDNA全长。通过提取中国水仙总冠的总RNA,反转录为cDNA二链,并以此为模板克隆得到DXPS的cDNA。DXPS的cDNA全长2338 bp,其中5′非编码区包含191 bp,3′非编码区包含242 bp,编码区为1905 bp(编码634个氨基酸,分子量为67.8 kDa)。通过BLAST工具在线比对发现,中国水仙DXPS氨基酸序列与喇叭水仙(AJ279019.1)、巴西橡胶树(AB294699.1)和侧金盏花(EF043284.1)的DXPS氨基酸序列的同源性较高,分别为92%、75%和75%。2、克隆得到DXR的cDNA全长(登录号为:GU574805)。这个基因也是甲基赤藓糖醇合成途径中的关键基因。中国水仙DXR基因cDNA全长为1606 bp。其中开放阅读框共1410 bp,编码470个氨基酸,分子量为51 kDa,5′非编码区为119 bp,3′非编码区为77 bp。经BLAST分析,中国水仙DXR氨基酸序列与万带兰(EU145744)、大麦(AJ583446)、阳春砂(FJ459894)、薄荷(AF116825)的DXR氨基酸序列的同源性较高,分别为81%、75%、77%和76%。3、采用同样方法获的PALcDNA片段序列(登录号为:GU574806)。该片段长1971 bp,编码586个氨基酸残基。该氨基酸序列与石蒜(ACM61988.1)、野芭蕉(BAG70992.1)、葡萄(XP-002268732.1)的PAL氨基酸同源性为91%、84%、83%。