自身炎症疾病是一类固有免疫系统紊乱的疾病,其特征主要表现为由髓系细胞介导的系统性炎症。遗传因素在自身炎症疾病的发生中起着关键作用。尽管在过去三十多年的研究中有超过50个自身炎症疾病的致病基因被鉴定发现,但仍有大量的患者无法被基因诊断。由于许多自身炎症疾病患者呈散发出现,并且患者的炎症症状在临床上的定义不精确,抑或在成年时才表现出明显症状,这使得研究者难以通过传统的连锁分析确定致病基因。基于此,我们采用了一种基于大规模高通量测序的基因型优先方法来鉴定自身炎症疾病的致病基因。具有相关症状的患者被招募到我们的未诊断疾病项目中进行高通量测序。对于未被分子确诊的患者,与表型分离的基因突变被筛选出作为候选,对在多例患者中出现的候选致病基因采用多种生化、分子细胞手段验证基因突变的致病性,阐明新致病基因的致病机制。通过基因型优先的方法,我们发现了一种由RIPK1 D324位点突变引起的新的自身炎症疾病。来自4个无亲缘关系家族的7例患者均存在RIPK1 D324位点的杂合变异（D324V,D324H和D324N）。这些变异未在任何公共数据库中被记录并通过计算机预测其对蛋白质功能有害（CADD评分大于24）。ELISA和qPCR实验发现患者体内存在着炎症信号的激活。对患者外周血单个核细胞进行单细胞RNA测序发现与年龄和性别匹配的健康对照组相比,该患者的单核细胞比例更高。我们观察到患者单核细胞中NF-kB和I型干扰素通路都有着明显的激活。机制探究显示,携带RIPK1变异的患者的PBMCs对TNF诱导的细胞死亡更为敏感,这解释了患者病理上的炎症表型。另外,我们报道了NLRC4 H443Q体细胞突变（somatic mutation）导致的晚发自身炎症疾病。NLRC4 H443Q的嵌合主要发生在髓系细胞中（单核细胞中5.69%）并且导致了髓系细胞中特异性的炎症信号增强。体细胞的NLRC4 H443Q变异导致了NLRC4炎症小体的激活。机制研究表明,NLRC4 H443Q突变相较其他已知的NLRC4致病突变导致了更强的NLRC4炎症小体激活和更多的白细胞介素IL-1b和IL-18的产生。此外,我们还探究了利用双硫仑靶向gasdermin D阻断IL-1b分泌的可行性,以用来治疗NLRC4炎症小体激活引起的自身炎症疾病。综上所述,通过基因型优先的方法,我们发现了一个新的致病基因RIPK1并首次报道了晚发型自身炎症疾病中的体细胞NLRC4嵌合现象。新发现的致病基因RIPK1和NLRC4体细胞突变将为自身炎症疾病的遗传诊断提供新的思路,为自身炎症疾病的治疗和众多针对自身炎症疾病开发的药物提供了新的靶点。