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目的:研究小白菊内酯在重症急性胰腺炎大鼠肝损伤的作用及其分子机制。方法:50只健康雄性SD大鼠被随机分为Sham组(假手术组腹腔内注射tween 80,n=10)、Model组(重症急性胰腺炎大鼠腹腔内注射tween 80,n=10)、Low-P组(腹腔内注射低剂量小白菊内酯100μg/kg治疗重症急性胰腺炎大鼠组,n=10)、Middle-P组(腹腔内注射中剂量小白菊内酯200μg/kg治疗重症急性胰腺炎大鼠组,n=10)、High-P组(腹腔内注射高剂量小白菊内酯3000μg/kg治疗重症急性胰腺炎大鼠组,n=10)。Model组和Sham组腹腔内均注射tween 80(0.05%)。采用腹腔内注射水合氯醛麻醉SD大鼠。应用3.5%牛磺胆酸钠逆行注射入大鼠胆胰管制备重症急性胰腺炎肝损伤动物模型。Sham组仅剖腹探查,转动十二指肠,触摸胰腺几次后,还纳十二指肠,逐层关腹。所有大鼠均术后12小时采集下腔静脉血,应用 ELISA kits检测血清 amylase(AMY)、alanine aminotransferase(ALT)、aspartate aminotransferase(AST)、tumor necrosis factor-α(TNF-α)和interleukin-6(IL-6)。切取肝组织,一部分肝组织检测NF-κB、p38MAPK、MKK3、caspase-3和 FasL 的变化;另一部分肝组织福尔马林固定,HE染色,观测其病理学形态。结果:1.Model组AMY(3456±51.17U/L)高于 Sham组(637.3±8.080U/L)(pp<0.0001)。Model 组 ALT(203.2±4.123 U/L)高于 Sham 组(45.60±6.634 U/L)(pp<0.0001)。Model组AST(520.1±9.768 U/L)高于 Sham 组(57.61±1.601U/L)(p<0.0001))。Model 组 TNF-α(132.5±7.071pg/ml)高于 Sham组(37.64±3.915 pg/ml)(pp<0.0001)。Model组IL-6(226.6±10.74 pg/ml)高于Sham组(32.68±3.486 pg/ml)(pp<0.0001)。综上述,Model 组 AMY、ALT、AST、TNF-α 和 IL-6均高于Sham组(p<0.0001)。造模12小时后Sham组肝小叶完整,门脉区域少量炎细胞浸润。绝大多数肝细胞形态正常。HE染色显示Model组大鼠肝小叶结构成损伤明显,细胞坏死的范围增加,仅在部分肝小叶周围有残留的变性肝细胞。肝小叶门脉区较大范围炎性细胞浸润。2.Model组大鼠血清 AMY 为 3456±51.17U/L,High-P 组大鼠 AMY 为1689±72.43U/L,Middle-P组大鼠AMY为2327±56.67 U/L,Low-P组大鼠AMY为 2786±4.90U/L。High-P组、Middle-P大鼠血清AMY含量分别为 Model组大鼠 0.49倍(p<0.001)和 0.67倍(p<0.05),AMY显著降低。Low-P组和Model组差异无显著性(p>0.05)。Model组大鼠ALT为 203.2±4.123U/L,High-P组ALT为 113.4±3.801U/L,Middle-P组ALT为 138.7±2.668 U/L,Low-P组ALT为 166.2±2.801U/L。High-P、Middle-P和 Low-P组ALT均高于Model组(p<0.05)。Model组大鼠AST 为 520.1±9.768U/L。High-P 组 AST 为 268.0±8.675U/L,Middle-P组AST为375.0±9.402 U/L,Low-P组AST为461.8±6.349U/L。和Model组比较,High-P组AST明显降低(p<0.001),Middle-P也有下降(p<0.05),而Low-P组无统计学差异(p>0.05)。Model组大鼠血清IL-6为226.6±10.74pg/mL,High-P组IL-6为 76.50±7.072U/pg/mL L,Middle-P组IL-6为 132.4±12.36 pg/mL,Low-P组IL-6为 174.7±10.74 pg/mL。和Model组比较,High-P组大鼠血清IL-6明显降低(p<0.001),Middle-P也有下降(p<0.05),而Low-P组无统计学差异(p>0.05)。Model组大鼠血清TNF-α为 132.5±7.071 pg/mL,High-P组为 58.27±6.344 pg/mL,Middle-P组为 80.28±7.141 pg/mL,Low-P组为 101.7±10.28 pg/mL。和Model组比较,High-P组大鼠血清TNF-α明显降低(p<0.001),Middle-P组也有下降(p<0.05),而Low-P组无统计学差异(p>0.05)。综上述,与Model组比较,应用小白菊内酯干预后,小白菊内酯治疗组血清AMY、ALT、AST、IL-6和TNF-α均降低,并且降低程度与小白菊内酯呈剂量依赖性。与Model组比较,小白菊内酯组肝脏病理改变明显减轻,并呈剂量相关性。中、低剂量一定程度上减轻了肝脏损伤。与中、低剂量组小白菊内酯组比较,高剂量组肝细胞轻度水肿,肝窦轻度扩张、充血,肝细胞点状坏死或轻微灶性坏死,无明显的片状坏死,汇管区炎细胞浸润不明显,显著改善了肝损伤状况。3.Western blot显示:与Model组比较,高、中剂量小白菊内酯组肝组织NF-κB下降(p<0.05),低剂量小白菊内酯组肝组织NF-κB无差异(p>0.05);3种剂量小白菊内酯组肝组织磷酸化p38MAPK均下降(p<0.05)。但是,与Model组比较,3种剂量小白菊内酯磷酸化MKK3无差异(p>0.05)。4.与Model组比较,高、中剂量小白菊内酷组肝组织FasL、caspase-3均降低(p<0.05),并且这种作用存在剂量相关性。低剂量小白菊内酯处理SAP大鼠后,肝组织中FasL和caspase-3变化不大,跟Model组相比,无统计学差异(ppp>0.05)。结论:1.牛磺胆酸钠逆行注射入胆胰管制备重症急性胰腺炎大鼠存在肝损伤。重症急性胰腺炎大鼠炎症因子TNF-α及IL-6被激活。小白菊内酯降低重症急性胰腺炎大鼠血清TNF-α及IL-6并减轻肝损伤。2.小白菊内酯降低重症急性胰腺炎大鼠肝脏p38MAPK、NF-κB、FasL以及caspase-3表达,提示小白菊内酯可能通过抑制以上因子表达从而减轻重症急性胰腺炎肝损伤。3.小白菊内酯不能降低重症急性胰腺炎大鼠肝脏MKK3表达,提示MKK3可能不是小白菊内酯作用靶点;小白菊内酯可能通过抑制p38MAPK磷酸化从而抑制NF-κB、FasL表达,抑制肝细胞凋亡,减轻肝细胞炎症损伤,从而减轻重症急性胰腺炎肝损伤。