为了防治作物病虫害,有机农药已成为农业保产增产的重要手段。多菌灵作为一种高效、广谱杀菌剂,在农业上应用广泛,但多年连续使用导致其在土壤和农产品中的残留量过高,影响土壤环境,威胁食品质量安全。因此,对多菌灵等农药污染的环境进行修复是必要而紧迫的。本试验以本研究室已分离得到的两种多菌灵降解菌产碱杆菌(Alcaligenes sp.)和红球菌(Rhodococcus sp.)为出发菌株,通过复配获得高效复合降解菌,采用紫外分光光度法和高效液相色谱法测定多菌灵的残留量,对高效复合菌的降解特性和土壤应用进行了研究。主要内容及结论如下:(1)试验将两株多菌灵降解菌(A:产碱菌属;R:红球菌属)按不同比例进行复配,得到高效复合降解菌AR5(投加量比例为A:R=1:4)。在30℃、pH6.0、接种量5%、150r/min的条件下,该菌可在48h内完全降解200mg/L的多菌灵,降解效果优于单菌。经扫描电镜观察发现,降解菌A为杆状,菌体大小约为2μm×0.5μm;降解菌R为球菌,菌体直径约为1μm。经菌落计数,得出复合菌系AR5中A、R的菌体数目之比约为1:1。(2)复合菌AR5对多菌灵具有较高的耐受能力和降解能力,72h内可将初始浓度为400~600mg/L的多菌灵降解至10mg/L左右,完全降解初始浓度为100mg/L和300mg/L的多菌灵所需时间分别为24h和72h。正交优化试验结果表明,pH值对复合菌降解率有显著影响,而温度和接种量影响较小;降解条件最佳组合为温度30℃、pH6.0、接种量7%,24h对200mg/L多菌灵的降解率可达75.76%。外加0.2%的氮源如尿素、酵母浸粉可以提高复合菌AR5对多菌灵的降解率,而添加同样浓度的碳源对其降解能力影响不大。(3)降解谱试验结果显示,高效复合菌AR5对100mg/L的噻菌灵、甲基硫菌灵、甲霜灵、联苯菊酯、溴氰菊酯等几种常用农药均能表现出降解作用,摇瓶培养72h时的降解率分别为84.7%、90.2%、39.2%、53.5%、57.6%。(4)试验考察了复合菌AR5对土壤中多菌灵的降解能力、复合菌与植物病菌的关系以及复合菌的植物安全性。结果表明,在温度30℃、接种量5%的条件下,复合菌对土壤中50、100、200mg/kg的多菌灵都有很好的降解能力, 5d时的降解率分别为100%、100%、95.2%;土壤含水率对降解率有较大影响,含水率25%优于含水率20%、15%;自然土壤中的降解率略高于灭菌土壤,说明复合菌可与土壤中的土著微生物协同降解多菌灵。复合菌对玉米弯孢叶斑病菌、烟草赤星病菌、苹果腐烂病菌、马铃薯干腐病菌、番茄早疫病菌、辣椒疫霉病菌、南瓜枯萎病菌、黄瓜灰霉病菌均有拮抗作用,说明作为多菌灵降解菌的同时,该复合菌还具有防治植物病害的潜力。稀释20倍的复合菌液,对小白菜种子、番茄种子、黄瓜种子的发芽活力影响很小,且未发现复合菌对以上三种蔬菜有致病作用。