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目的:探讨呼吸道合胞病毒毛细支气管炎(RSV毛支)大鼠中肺组织和血液中Th17、Treg细胞的增殖分化及其相关细胞因子的变化特点,以及人胎盘间充质干细胞移植对呼吸道合胞病毒毛细支气管炎大鼠肺组织和血液中Th17、Treg影响的研究。方法:24只3周龄健康清洁级雄性SD幼鼠,按照随机对照原则分为3组,每组8只,即正常组(N)、RSV毛支组(RSV-B)、人胎盘间充质干细胞移植组(hpMSCs)。滴鼻法成功建立RSV毛支模型后,通过对肺组织行大体标本观察、HE染色,血浆中相关炎性因子(IL-4、ECP、IgE等)的检测来证实RSV感染SD大鼠制备毛支模型成功。用IV型胶原酶酶消化法提取人胎盘间充质干细胞并进行体外扩增,通过观察细胞生长形态、成骨、成脂细胞的诱导及特异性的表面标记分子证明所提取的细胞就是人胎盘间充质干细胞。病毒接种后,向大鼠尾静脉内注射hpMSCs进行干细胞移植治疗。8周后,收集各组大鼠血液提取外周血单个核细胞(PBMC)接种于24孔板中,体外培养18h后,用FCM检测培养体系中Th17、Treg细胞的百分率;取各组大鼠肺组织行HE染色做病理学切片;采用Elisa法检测血浆中IL-17、IL-23、IL-10、TGF-β的含量;采用实时荧光定量PCR检测肺组织中RORγt mRNA、Foxp3 mRNA的表达;采用Western Blot检测肺组织中RORyt、Foxp3蛋白的含量。结果:1.通过滴鼻法成功建立RSV毛细支气管炎动物模型。2.人胎盘间充质干细胞的提取、培养扩增及多向分化能力:通过酶消化法分离、培养并扩增人胎盘间充质干细胞。经体外诱导可知,人胎盘间充质干细胞可以向成骨细胞、脂肪细胞等多种细胞分化。提取到的细胞经流式细胞技术检测发现可低表达CD34、CD45、HLA-DR等分子,高表达CD73、CD95和CD105等分子。3.与正常组相比,RSV-B组大鼠外周血来源的PBMC中Th17的百分率显著增加(P<0.05);与RSV-B组相比,hpMSCs移植组PBMC中Th17的百分率显著减少(P<0.05)。与正常组相比,RSV-B组大鼠外周血来源的PBMC中Treg百分率显著减少(P<0.05);与RSV-B组相比,hpMSCs移植组PBMC中Treg的百分率显著增加(P<0.05)。4.与正常组相比,RSV-B组可见肺间质炎症明显,肺泡腔变小,肺泡间隔增宽,气管和血管周围有炎性细胞聚集浸润,支气管上皮细胞变性坏死致使塌陷变形,管壁肿胀变厚。与RSV-B组相比,hpMSCs移植组大鼠肺组织病理改变较RSV-B组明显改善。5.与正常组相比,RSV-B组大鼠血浆中IL-17, IL-23表达水平均增高(P<0.05);与RSV-B组相比,hpMSCs移植组大鼠血浆中IL-17,IL-23表达水平降低(P<0.05)。与正常组相比,RSV-B组大鼠血浆中IL-10, TGF-β表达水平均降低(P<0.05);与RSV-B组相比,hpMSCs移植组大鼠血浆中IL-10, TGF-β表达水平增高(P<0.05)。6.与正常组相比,RSV-B组大鼠肺组织中RORytmRNA,RORyt蛋白的表达水平均上调(P<0.05);与RSV-B组相比,hpMSCs移植组大鼠肺组织中RORyt mRNA、RORyt蛋白表达水平均下调(P<0.05)。与正常组相比,RSV-B组大鼠肺组织中Foxp3mRNA,Foxp3蛋白表达水平均下调(P<0.05);与RSV-B组相比,hpMSCs移植组大鼠肺组织中Foxp3mRNA, Foxp3蛋白表达水平均上调(P<0.05)。结论:1.RSV滴鼻法可成功复制毛细支气管炎动物模型。通过移植hpMSCs可以减轻RSV毛支大鼠的气道炎症反应和肺部炎症。2.经酶消化法分离提取并培养、传代的人胎盘间充质干细胞,具有向成骨细胞、成脂细胞等细胞多向分化的能力。3.RSV毛支大鼠血液中存在Treg细胞百分率降低,Th17细胞比例升高,肺组织中存在特异性转录因子RORyt、Foxp3的失衡。这种TH17、Treg及其特异性转录因子的失衡可能是导致毛支发病免疫反应的重要机制。4.人胎盘间充质干细胞可能通过调节TH17、Treg细胞的数量及其相关细胞因子来发挥其对RSV毛支炎症的抑制作用。