目的:本研究以中药复方黄蒲通窍胶囊为研究对象,初步阐明黄蒲通窍胶囊的体外物质基础。同时,探讨黄蒲通窍胶囊对阿尔茨海默病(Alzheimer’s Disease,AD)动物模型的神经保护作用和对EGFR-PLCγ信号通路的影响,以期为黄蒲通窍胶囊的现代化和国际化提供参考,为黄蒲通窍胶囊治疗AD提供更为坚实的实验基础,从而使黄蒲通窍胶囊在临床治疗AD发挥最大程度上的作用与疗效。方法:1.黄蒲通窍胶囊的体外物质基础建立同时测定黄蒲通窍胶囊中对二苯乙烯苷、阿魏酸、人参皂苷Rg1、芦荟大黄素、β细辛醚、大黄素和大黄酚的超高效液相色谱(UPLC)方法,初步明确黄蒲通窍胶囊中的主要有效成分。2.黄蒲通窍胶囊对阿尔茨海默病大鼠海马EGFR-PLCγ信号通路的影响选择清洁级健康成年Sprague-Dawley(SD)大鼠,随机分为:假手术组(Sham)、模型组(Model)、黄蒲通窍胶囊组(HPTQC)、尼莫地平组(NMP)共计4组,每组10只。运用腹腔注射D-半乳糖联合双侧海马注射Aβ25-35的方法进行造模,假手术组注射生理盐水。经过连续28天给药之后,运用Morris水迷宫实验进行各组大鼠学习记忆能力的检测;HE染色法检测各组大鼠海马神经元损伤情况;采用免疫荧光法检测各组大鼠海马CA1区EGFR和p-tau表达情况;采用Western blot法检测各组大鼠海马EGFR、PLCγ、IP3R、p-tau蛋白表达情况;采用RT-PCR法检测各组大鼠海马EGFR、PLCγ、IP3R、tau的m RNA含量。结果:1.黄蒲通窍胶囊的体外物质基础:二苯乙烯苷、阿魏酸、人参皂苷Rg1、芦荟大黄素、β细辛醚、大黄素和大黄酚,以上7种物质为黄蒲通窍胶囊的主要成分。2.黄蒲通窍胶囊对AD大鼠的药效学研究(1)水迷宫结果显示:与假手术组相比较,模型组大鼠逃避潜伏期明显延长(P<0.01),穿越平台次数明显减少(P<0.01);与模型组相比较,黄蒲通窍胶囊组大鼠逃避潜伏期明显缩短(P<0.05),穿越平台次数明显增多(P<0.05)。(2)HE染色结果显示:假手术组大鼠海马CA1区神经元层数较多,排列紧密整齐,形态完整,染色均匀,核仁深染。模型组大鼠海马CA1区神经元细胞形态出现明显改变,层数减少,排列松散不均匀,核仁固缩伴有明显破裂,死亡神经元多见。黄蒲通窍胶囊组大鼠海马CA1区神经元分布则相对均匀,排列较为紧密。3.黄蒲通窍胶囊对AD大鼠EGFR-PLCγ信号通路的影响(1)免疫荧光结果显示:与假手术组相比较,模型组大鼠海马CA1区EGFR、p-tau荧光强度均明显增强(P<0.01);与模型组相比较,黄蒲通窍胶囊组大鼠海马CA1区EGFR、p-tau荧光强度均明显降低(P<0.01)。(2)Western Blot结果显示:与假手术组相比较,模型组大鼠海马EGFR、PLCγ、IP3R、p-tau蛋白表达均明显增加(P<0.01);与模型组相比较,黄蒲通窍胶囊组大鼠海马EGFR、PLCγ、IP3R、p-tau蛋白表达均明显降低(P<0.05)。(3)RT-PCR结果显示:与假手术组相比较,模型组大鼠海马EGFR、PLCγ、IP3R、tau的m RNA表达均明显增加(P<0.01);与模型组相比较,黄蒲通窍胶囊组大鼠海马EGFR、PLCγ、IP3R、tau的m RNA含量均明显降低(P<0.05)。结论:1.黄蒲通窍胶囊的主要成分有二苯乙烯苷、阿魏酸、人参皂苷Rg1、芦荟大黄素、β细辛醚、大黄素和大黄酚。2.黄蒲通窍胶囊可改善AD大鼠学习记忆能力,具有神经保护作用。3.黄蒲通窍胶囊对AD动物模型的作用机制可能与调节EGFR-PLCγ信号通路有关。