【摘 要】
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卵泡抑素(Follistatin)是一种分泌蛋白,它可以拮抗TGF-beta(transforming growth factor,转化生长因子)超家族中几种成员的功能,包括Myostatin.Myostatin是目前所知的最强的
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卵泡抑素(Follistatin)是一种分泌蛋白,它可以拮抗TGF-beta(transforming growth factor,转化生长因子)超家族中几种成员的功能,包括Myostatin.Myostatin是目前所知的最强的肌肉抑制因子,Follistatin通过直接的蛋白结合而拮抗Myostatin对肌肉发育的抑制作用,表现出增肌效应.Follistatin的增肌效应既包括数量肥大(肌纤维数量增多)也包括质量肥大(肌纤维增粗).Follistatin增肌效应并非病态的肌肉增长,对其它的组织与器官亦无有害的影响,这在畜牧业的生产上对提高家畜的肉用性状有着深广的实用意义.为了与实验室进行的对Myostatin的研究结合,该实验进行了牛Follistatin cDNA的克隆及原核表达.该实验从牛的卵巢中用Trizol提取总RNA,并通过RT-PCR(反转录PCR)的方法扩增获得Follistatin cDNA.经正反测序表明其与GenBank中发表的牛Follistatin cDNA序列完全相同.将获得的Follistatin cDNA基因克隆入原核表达载体pET-30a中,组装成了原核表达载体pET-30a-fs2,经正反测序表明其阅读框正确.将这个表达载体转化入大肠杆菌表达菌株BL21(DE3)中,IPTG诱导培养后,经SDS-PAGE和Western杂交实验检测可知特异性表达带约在44KD的位置,其表达量大约占细菌总蛋白的30﹪左右.Follistatin今后可能会用于治疗人类肌肉性疾病,以及提高家畜肌肉的质量和数量,该实验为这方面的研究提供了一定的实验基础.
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