【摘 要】
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根据GenBank上已发表的序列,设计引物,利用PCR技术扩增出了PhiX174噬菌体裂解基因E(Lysis gene E),构建了温控原核表达载体pBV-E和融合原核表达载体pGEX-E。为提高菌体裂解效
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根据GenBank上已发表的序列,设计引物,利用PCR技术扩增出了PhiX174噬菌体裂解基因E(Lysis gene E),构建了温控原核表达载体pBV-E和融合原核表达载体pGEX-E。为提高菌体裂解效率,又设计引物扩增出核酸酶A(SN)基因,插入Linker与E基因相连接,构建了串连温控表达载体和串连融合表达载体。在SN辅助杀伤作用下,菌体裂解率最高达到99.9%。将构建的载体转入致仔猪水肿病大肠杆菌O138,诱导表达,成功制备了大肠杆菌O138菌影,并免疫实验动物昆明小鼠,诱导机体产生了较高的中和抗体水平及细胞免疫水平,所制备的大肠杆菌O138菌影对实验动物保护率为100%。
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