FK506预处理下骨髓移植诱导小鼠重度烫伤后同种异体皮肤移植耐受的实验研究

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【研究背景】大面积深度烧伤后,一方面自体皮源严重缺乏,早期往往难以利用自体皮移植封闭创面;另一方面移植的异体皮只能暂时覆盖创面而不能长期成活;因此,严重制约了大面积烧伤创面的早期修复。针对上述临床治疗中的这一难点,并随着近年来移植免疫研究的进展,如何诱导供体特异性的免疫耐受,使移植的异体皮能长期存活甚至永久覆盖创面,成为了一个令人关注的问题。此外,重度烧伤后,机体呈现严重的免疫抑制状态,尤其是T细胞免疫的抑制,使T细胞对异体抗原呈低反应性,这就为异体干细胞的顺利植入创造了条件。即可以在不用全身放射线照射、大剂量细胞毒药物或免疫抑制剂等清髓措施的情况下,对受体进行低强度的预处理,然后进行骨髓干细胞移植,以诱导特异性免疫耐受。本实验即在小鼠重度烫伤的模型中,探讨在FK506预处理后行骨髓移植(BMT)来形成嵌合体,以诱导供体特异性的免疫耐受从而延长同种异体皮的存活时间。【研究目的】探讨短期大剂量FK506预处理后进行骨髓移植,诱导重度烫伤小鼠对同种异体皮肤移植物免疫耐受的可行性。【研究内容】1.小鼠重度烫伤模型的建立及伤后细胞免疫变化的观察。2.烫伤小鼠FK506预处理、骨髓移植和皮片移植。3.移植皮片成活情况、免疫排斥及嵌合体形成状态的观察。【研究结果】1.小鼠重度烫伤后CD3~+、CD4~+T细胞比例下降,而CD8~+T细胞比例升高,CD4/CD8比值下降,明显低于正常值。2.单纯短期FK506给药或骨髓移植并不能延长皮肤移植物的存活时间。3.实验组(FK506+BMT)小鼠的皮肤移植物存活时间为(16.8±1.30)天,比其他组明显延长(P<0.05),且对第三方KM小鼠仍维持正常的免疫反应。4.伤后7天、14天、30天受体小鼠外周血内供体来源血细胞嵌合率分别为32%±2.7%、10%±3.1%和1.5%±0.2%。【研究结论】1.小鼠严重烫伤后T细胞免疫呈抑制状态。2.利用重度烫伤后小鼠体内的细胞免疫抑制状态,在FK506预处理的基础上行骨髓移植,可以形成混合嵌合体。3.利用骨髓混合嵌合体可在烫伤小鼠诱导一定程度的特异性免疫耐受,延长同种异体皮肤移植物的存活时间。
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