脂联素通过AMPK和Wnt/β-catenin影响足细胞synaptopodin基因转录和表达

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目的:1、研究脂联素对足细胞synaptopodin基因表达的影响。2、AMPK活性对足细胞synaptopodin表达的影响。3、Wnt/β-catenin信号通路对足细胞synaptopodin表达的影响。方法:1、小鼠足细胞的培养,细胞形态观察及RT-PCR方法鉴定足细胞。2、用realtime PCR方法观察高糖或PAN对足细胞synaptopodin表达的影响。3、分别用不同浓度脂联素和同一浓度不同时间作用于足细胞,用Realtime PCR方法检测synaptopodin基因mRNA表达的变化。4、(1)AMPK激动剂AICAR和AMPK抑制剂Compound C干预足细胞后观察有或无脂联素情况下足细胞synaptopodin表达情况。(2)AMPKα1-siRNA干预足细胞后观察有或无脂联素情况下足细胞synaptopodin表达的影响。5、(1)GSK-3β抑制剂氯化锂刺激足细胞Wnt/β-catenin信号,观察有或无脂联素情况下足细胞synaptopodin表达的变化。(2)GSK-3β的siRNA激活足细胞Wnt/β-catenin信号,观察有或无脂联素情况下足细胞synaptopodin表达的变化。结果:1、synaptopodin仅表达于已分化足细胞,在未分化足细胞无表达。2、高糖或PAN抑制synaptopodin表达。3、不同浓度脂联素(0-5ug/ml)作用于足细胞后,可以促进synaptopodin基因mRNA的表达;同一浓度脂联素作用不同时间,synaptopodin mRNA表达随刺激时间的延长而增加。4、AMPK激动剂AICAR促进synaptopodin表达,而AMPK抑制剂CompC和AMPKα1-siRNA抑制了synaptopodin的表达。5、GSK-3β抑制剂氯化锂和GSK-3β的siRNA抑制足细胞synaptopodin的表达。结论:脂联素可以明显促进足细胞synaptopodin表达及转录,而且这种作用可能是通过AMPK和Wnt/β-catenin信号通路进行的。
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