低熔点琼脂糖的改性与制备技术研究

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低熔点琼脂糖是经过化学修饰的琼脂糖,其修饰的程度决定了产品的熔化和凝固的温度。低熔点琼脂糖具有琼脂糖的热可逆特性,在生物、医学等领域中具有极其重要的地位。本文通过对琼脂糖的改性,探讨了不同改性方法及其改性原理,比较了不同改性方法对琼脂糖改性效果的影响。在此基础上,考察工艺条件的变化对改性琼脂糖的熔点及凝胶强度的影响,开发出熔点在65℃左右的低熔点琼脂糖,并对低熔点琼脂糖的各种指标进行测定。1)实验以熔点、凝胶强度、硫酸根含量、白度和复溶性等为评价指标,分别探讨了1,2-环氧丙烷、二氯乙醇、环氧氯丙烷、二溴丙烷、三溴丙烷等几种改性剂对琼脂糖的改性前后的变化,并比较了不同改性剂对琼脂糖改性的效果。结果显示,1,2-环氧丙烷法和二氯乙醇法对琼脂糖的熔点和凝胶强度的改变影响较大,而且从白度和复溶性来看,1,2-环氧丙烷法和二氯乙醇法所得到的效果亦优于其它3种方法。2)在琼脂糖水溶液中加入1,2-环氧丙烷,制备低熔点琼脂糖。考察了反应时间、反应温度和1,2-环氧丙烷添加量对改性后琼脂糖熔点和凝胶强度的影响,通过响应面实验探讨最佳的改性工艺。结果表明,各改性条件对琼脂糖改性效果的影响主次顺序依次为1,2-环氧丙烷添加量>反应时间>反应温度。最佳改性工艺条件为:6g琼脂糖、添加1,2-环氧丙烷7.51mL、反应温度25℃、反应时间1.0h。3)在琼脂糖水溶液中加入二氯乙醇,制备低熔点琼脂糖。考察反应时间、反应温度和二氯乙醇添加量对改性后琼脂糖熔点和凝胶强度的影响,再通过响应面实验探讨最佳的改性工艺。结果表明,各改性条件对琼脂糖改性效果的影响主次顺序依次为二氯乙醇添加量>反应时间>反应温度。得到的最佳改性工艺条件为:6g琼脂糖、添加二氯乙醇3.25mL、反应温度60℃、反应时间1.0h。4)分别测定1,2-环氧丙烷和二氯乙醇改性得到的低熔点琼脂糖产品的熔点、凝胶强度、凝固温度、硫酸根含量、电内渗、白度、结晶紫电泳的距离以及灰分,并分别利用红外光谱、核磁共振、DNA电泳、透射电镜、扫描电镜等方法对低熔点琼脂糖产品进行物理、化学指标的测定及结构分析。实验结果:利用1,2-环氧丙烷法或二氯乙醇法制备出的低熔点琼脂糖的各项指标及性能与国外进口低熔点琼脂糖相近,在生化、医学研究应用方面,能满足国内的科研需求。
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