【摘 要】
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目的:优化光合细菌(PSB)产CoQ,培养基及培养条件和克隆ubiA基因,为获取高产CoQ,基因工程菌及确定规模化发酵工艺奠定良好的基础.方法:皂化法抽提PSB菌体CoQ,根据CoQ含量筛选
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目的:优化光合细菌(PSB)产CoQ<,10>,培养基及培养条件和克隆ubiA基因,为获取高产CoQ<,10>,基因工程菌及确定规模化发酵工艺奠定良好的基础.方法:皂化法抽提PSB菌体CoQ<,10>,根据CoQ<,10>含量筛选高产菌株.利用均匀设计原理进行实验设计,以优化培养基中碳源、氮源、磷源、生长因子、前体物及无机盐成份的配方以及细菌培养条件.实验数据采用均匀设计软件包进行逐步回归分析.根据E-coli MC4100的ubiA基因全碱基顺序,合理设计引物,以E-coli MC4100基因组DNA为模板进行PCR扩增,将PCR产物克隆于pUCm-T Vector后对其进行测序鉴定.结论:该研究建立了快速测定PSB菌体内CoQ<,10>含量的方法.为提高PSB菌体CoQ<,10>含量,利用均匀设计成功地优化了PSB产CoQ<,10>,发酵培养基配方及培养条件,并成功克隆了ubiA基因,为后期构建产CoQ<,10>基因工程菌奠定了良好基础.
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