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本文对别构调节sigma-机1受体的抗抑郁作用及其制进行了研究。本研究分为两个部分： 第一部分：SOMCL-668具有别构调节sigma-1受体的活性。 目的：Sigma-1受体在抑郁症等众多神经精神疾病治疗中有重要作用，同时，别构调节是调节受体功能重要途径之一。因此，别构调节sigma-1可能成为抑郁症治疗的新靶点。前期竞争结合实验表明，新型化合物3-methyl-phenyl-2,3,4,5-tetrahydro-1H-benzo[d]azepin-7-ol(SOMCL-668)能以别构调节的方式促进sigma-1受体特异性激动剂3H-(+)-pentazocine与sigma-1受体的结合。在此研究基础上，本部分将从生物学功能角度进一步证实SOMCL-668的别构调节功能，从而为研究别构调节sigma-1受体的作用提供有力支持。 方法：培养 HT22小鼠海马神经元细胞系，采用细胞免疫荧光法，检测SOMCL-668单独或联用sigma-1受体激动剂(+)SKF-10047对sigma-1受体与Bip(binding immunoglobulin protein)蛋白共定位的影响；采用免疫共沉淀方法，检测SOMCL-668单独或联用sigma-1受体激动剂(+)SKF-10047对sigma-1受体与Bip结合情况的影响；分离细胞膜成分，检测SOMCL-668单独或联用sigma-1受体激动剂(+)SKF-10047对sigma-1受体转位现象的影响；培养原代神经元，检测SOMCL-668单独或联用sigma-1受体激动剂(+)SKF-10047对神经元神经突起生长以及BDNF(brain-derived neurotrophic factor,脑源性神经营养因子)分泌的影响。 结果：SOMCL-668本身不能改变sigma-1受体和Bip的共定位或结合，但是可以明显促进激动剂诱导的sigma-1受体与Bip的分离；同时，SOMCL-668单独不能，但联用激动剂后显著增加sigma-1受体向细胞膜的转位；此外，SOMCL-668自身不具备，但是可以显著增加激动剂诱导的神经突起生长和BDNF分泌的能力。 结论：SOMCL-668具备别构调节sigma-1受体的活性，是一种新型的sigma-1受体别构调节剂。 第二部分：别构调节sigma-1受体具有抗抑郁作用。 目的：本部分将以SOMCL-668为工具，重点考察别构调节sigma-1受体是否产生抗抑郁作用，并探讨其可能的抗抑郁作用机制。 方法：⑴采用小鼠强迫游泳、悬尾实验等急性抗抑郁药物筛选模型初步探讨SOMCL-668的抗抑郁作用；⑵采用慢性不可预知性温和刺激制作抑郁症模型，糖水偏好、旷场实验等检测 SOMCL-668的抗抑郁作用；免疫印迹法检测 SOMCL-668对抑郁症中BDNF-GSK3β(glycogen synthase kinase3β,糖原合成激酶3β)通路的影响变化；⑶采用免疫印迹法，同时应用药理学及分子生物学手段检测sigma-1受体对GSK3β活性的抑制作用及其调控机制；⑷采用免疫印迹法，从动物及细胞水平观察SOMCL-668对GSK3β活性的抑制作用；采用药理学手段间接激活GSK3β，考察GSK3β在SOMCL-668的抗抑郁效应中的作用。 结果：①SOMCL-668可以减少强迫游泳、悬尾实验中小鼠不动时间，表现出抗抑郁作用，提前给以sigma-1受体拮抗剂BD1047则取消其抗抑郁作用；②SOMCL-668可以改善抑郁症模型中小鼠快感缺乏、焦虑及体重下降等症状，同时可以缓解抑郁症导致的BDNF及GSK3β(ser-9)磷酸化水平的下调，并且SOMCL-668抗抑郁起效时间(1周内)优于现有抗抑郁药物文拉法辛。③给予sigma-1受体激动剂或过表达sigma-1受体均能增加GSK3β(ser-9)磷酸化水平(即抑制其活性)，且Trk B受体抑制剂、AKT通路抑制剂可以拮抗sigma-1受体对GSK3β(ser-9)磷酸化的影响。结果证实sigma-1受体可以调控GSK3β活性。④在动物实验中，SOMCL-668可以快速增加小鼠海马中GSK3β(ser-9)磷酸化水平，sigma-1受体拮抗剂BD1047则阻断这种作用；在细胞实验中，SOMCL-668可以通过别构调节的方式增加HT22细胞中GSK3β(ser-9)磷酸化水平，siRNA沉默 sigma-1受体表达后同样取消这种作用。药理学激活 GSK3β可以阻断SOMCL-668在强迫游泳及悬尾实验中的抗抑郁作用。 结论：sigma-1受体别构调节剂SOMCL-668具有快速的抗抑郁作用，其抗抑郁作用可能和BDNF-GSK3β通路有关，这将为抗抑郁药物研发提供新的策略。