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目的:建立具有稳定、持久低血氧饱和度并且适用于研究烟雾吸入性肺损伤的动物模型。观察肺组织生化环境的变化以及烟雾吸入性肺损伤的发生和发展进程。从而分析烟雾吸入性肺损伤的发病机制。并观察腹腔注射7-硝基吲唑(7-NI)的安全性,建立成熟的腹腔注射治疗途径。探讨7-NI对烟雾吸入性肺损伤大鼠的保护作用及作用机制。方法:1.建立烟雾吸入性肺损伤大鼠模型选用2月龄雄性SD大鼠(体重300±20g)为试验对象,完全随机选用8只为正常组(A组)大鼠,其余大鼠参照第三军医大学西南医院烧伤病研究所的方法建立烟雾吸入性肺损伤动物模型。制模完毕立即测量大鼠呼吸频率,呼吸频率大于30次/分的为烟雾吸入性肺损伤大鼠。2.实验分组将制模成功的大鼠完全随机分为2组: B组为未治疗组,给予腹腔注射2ml花生油;C组为7-NI治疗组,给予腹腔注射7-NI花生油溶液2ml(7-NI注射量20mg/kg)。3.大鼠动脉血气分析随机选取大鼠,分别于致伤后2、6、12、24h,分次进行腹主动脉采血,采血0.6ml,使用丹麦产ABL555型全自动血气分析仪进行动脉血气分析。4.肺组织的离体观察分别于致伤后2、6、12、24h分批处死大鼠,取肺组织,观察肺脏的肉眼变化,并使用数码相机拍照记录。取右下叶肺组织测肺含水量。肺含水量采用干湿重法测定:肺含水量=(肺湿重-肺干重)/肺干重。取左肺下叶组织称重标记,冷冻保存于-70℃环境。测量超氧化物歧化酶(SOD),过氧化氢酶(CAT)的活性,肿瘤坏死因子a(TNF-a)、一氧化氮(NO)、神经型一氧化氮合酶(nNOS)、及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的含量。其余肺组织置于10%福尔马林溶液中,固定组织块,经石蜡包埋切片,HE染色后,观察组织病理学改变。结果:1.大鼠的一般情况94.1%的大鼠制模成功,呼吸频率大于30次/分,出现呼吸浅快、张口呼吸、哮鸣音、精神萎靡等症状。致伤后2h,7-NI治疗组大鼠与未治疗组相比,呼吸频率减慢,无张口呼吸,哮鸣音消失,精神尚可。2. 7-NI对大鼠动脉血气的影响在整个实验过程中正常组大鼠动脉血氧分压一直维持在较高水平(>96mmHg)。以正常组为标准,烟雾吸入性肺损伤大鼠,动脉血氧分压在致伤后2小时降低29.3%(29mmHg),并一直维持在较低的水平(<70 mmHg),它们之间的差别具有统计学意义(p<0.05)。而7-NI明显抑制了这种趋势,在致伤后2小时,7-NI治疗组大鼠比未治疗大鼠动脉血氧分压显著升高19.5%(20mmHg),7-NI治疗组大鼠动脉血氧分压一直维持在较高水平(>80mmHg),在致伤后24小时7-NI治疗组大鼠动脉血氧分压上升至正常水平(96.4±5mmHg),它与未治疗组之间的差别具有统计学意义(p<0.05)。3. 7-NI对大鼠肺组织含水量的影响以正常组大鼠为标准,烟雾吸入性肺损伤大鼠,肺组织含水量显著升高,为正常组的1.9倍,而7-NI治疗组大鼠肺组织含水量仅轻微升高,为正常大鼠的1.2倍,对3组进行分析,他们之间的差别具有统计学意义(p<0.05)。4. 7-NI对肺组织生化环境的影响正常组大鼠SOD、CAT、nNOS的活性及NO的含量一直维持在正常水平,致伤后2小时,烟雾吸入性肺损伤大鼠SOD及CAT的活性下降,以正常组为标准,到24小时SOD的活性减少34%(16.4 U/gprot),CAT的活性减少35%(31.3 U/gprot),它们与正常组的差别具有统计学意义(p<0.05)。而致伤后烟雾吸入性肺损伤大鼠nNOS的活性及NO的含量一直稳定维持在高水平,与正常组相比,肺损伤大鼠nNOS的活性上升1.3倍(6.44 U/gprot),肺损伤大鼠NO的含量上升80%(4.54μmol/gprot)他们的差别具有统计学意义。致伤后未治疗组大鼠TNF-α含量在2h时较正常组升高96%(1.2pg/gprot),与正常组的差别具有统计学意义(p<0.05)。在6h后TNF-α含量开始下降并在12h基本降至正常水平。而7-NI明显抑制了这些变化的发生。致伤后2小时7-NI治疗组SOD及CAT的活性低于正常水平,2小时后7-NI治疗组SOD及CAT的活性逐渐上升,到致伤后24小时,7-NI治疗组SOD及CAT的活性仅略低于正常大鼠,它们之间的差异没有统计学意义(p>0.05)。7-NI治疗组nNOS活性及NO含量明显较未治疗组下降,其差别有统计学意义(p<0.05)。7-NI治疗组TNF-α含量在2h时明显较未治疗组下降,基本接近正常水平,与正常组差别无统计学意义(p>0.05)。5. 7-NI对肺组织病理变化的影响处死大鼠后,正常肺组织表面光滑,红润,无出血点,而未治疗组大鼠肺组织表面湿润,有散在出血点,切面有大量泡沫状液体流出。组织切片HE染色发现肺泡腔内有大量中性粒细胞浸润,肺间质和肺泡腔内有大量液体渗出及间质增生。而7-NI治疗组炎性细胞明显减少,肺间质未见增生。结论:反复多次烟雾吸入可诱导成年大鼠出现稳定、长期的低氧血症,成为烟雾吸入性肺损伤大鼠,并且表现出急性肺损伤的病理表现。7-NI可有效地抑制烟雾吸入肺损伤大鼠的低氧血症,这种保护作用可能是通过抑制nNOS的活性减少内源性NO的产生,增加了肺组织内的抗氧化能力,从而减轻肺组织炎性浸润,对烟雾吸入性肺损伤有较好的保护作用。