论文部分内容阅读
目的研究中药复方丹参通络解毒汤联合骨髓干细胞移植对急性心肌梗死大鼠内皮的保护作用及其分子机理。方法采用全骨髓贴壁法结合密度梯度离心法分离和培养BMSCs。经结扎冠状动脉的左前降支(LAD)建立心梗模型。成功后,随机分为SH(假手术组)、AMI组(AMI模型组)、BMSCs组(BMSCs移植组)、中药组(丹参通络解毒汤组)、联合组(丹参通络解毒汤+BMSCs移植组),每组10只。BMSCs细胞悬液直接注入梗死区边缘心肌组织;中药或生理盐水经灌胃给予。4周后,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定各组大鼠血清一氧化氮(NO)、内皮素-1(ET-1)的水平,Masson染色观察心肌组织胶原含量,免疫组化法观察血管性假性血友病因子(vWF)蛋白表达,蛋白印迹法(WestNern Blotting)测定心肌组织血栓调节蛋白(TM)和内皮细胞蛋白C受体(EPCR)蛋白的表达水平。结果本研究结果显示,与假手术组比较,各组ET-1水平明显升高,NO水平明显降低,有不同程度的胶原纤维产生,vWF蛋白表达升高,EPCR、TM蛋白表达下降,差异有显著性(P<0.01);与模型组比较,干细胞移植组、丹参通络解毒汤组和丹参通络解毒汤联合移植组ET-1水平明显降低,NO水平明显升高,胶原纤维产生减少,vWF蛋白表达降低,EPCR、TM蛋白表达升高,差异具有显著性(P<0.01);与干细胞移植组比较,丹参通络解毒汤组的ET-1水平明显降低,NO水平明显升高,胶原纤维产生减少,vWF蛋白表达降低,EPCR、TM蛋白表达升高,差异具有显著性(P<0.01);与干细胞移植组,丹参通络解毒汤组比较,丹参通络解毒汤联合移植组ET-1水平明显降低,NO水平明显升高,胶原纤维产生减少,vWF蛋白表达降低,EPCR、TM蛋白表达升高,差异具有显著性(P<0.01)。研究显示丹参通络解毒汤可以明显降低ET-1水平,升高NO水平,减少胶原纤维产生,降低vWF蛋白表达,升高EPCR、TM蛋白表达,保护血管内皮,且联合干细胞移植时效果更强。结论1.丹参通络解毒汤可以明显提高心肌组织血管内皮细胞蛋白C受体(EPCR)、血栓调节蛋白(TM)表达,降低血管性假性血友病因子(vWF)蛋白表达,降低血清ET-1水平,升高NO水平,抑制心肌组织制胶原纤维增生,改善心肌病理形态,抑制血栓形成,保护血管内皮,且联合干细胞移植时效果更强。2.丹参通络解毒汤联合BMSCs移植可以明显提高EPCR、TM蛋白表达,降低vWF蛋白表达,降低AMI鼠血清ET-1水平,升高NO水平,保护血管内皮,从而减少胶原纤维产生,保护缺血心肌。