猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)是一种能引起哺乳仔猪严重腹泻甚至死亡的高度接触性肠道冠状病毒,对当前新生仔猪健康造成了严重的威胁。PEDV主要通过靶向入侵猪肠道中肠绒毛上皮细胞,破坏其粘膜免疫系统屏障而引起仔猪发病。分泌型免疫球蛋白(sIgs)介导的粘膜免疫应答在控制PEDV感染过程中发挥着重要的作用,而sIgs的分泌主要取决于多聚免疫球蛋白受体(p IgR),因此,探究pIgR在病毒感染复制过程中的作用,对解析PEDV的致病机理具有重要价值。sIgs主要依赖p IgR分泌至肠腔以抵御肠道病原微生物的入侵。为了解p IgR在PEDV感染后的表达情况,我们在前期PEDV FJzz1株感染试验的基础上,选取PEDV感染组与正常对照组试验仔猪的不同肠段,检测各肠段中p IgR的mRNA变化情况。结果显示,与正常对照组相比,PEDV感染组仔猪不同肠段内pIgR的mRNA水平均显著增加,表明PEDV感染后显著上调宿主体内p IgR的转录。在体外,我们将PEDV FJzz1株感染宿主细胞LLC-PK1分析了pIg R表达变化。结果显示,FJzz1株感染12 h后p IgR的mRNA显著增加,但与此相反,在病毒感染18 h后pIgR的蛋白水平却明显下降。为了探究pIgR对PEDV增殖的影响,我们将FJzz1株感染p Ig R过表达的宿主细胞,通过RT-qPCR以及子代病毒TCID50测定等检测病毒的增殖情况,结果显示,PEDV的N蛋白、病毒滴度以及病毒mRNA均显著增加,表明过量表达pIgR可促进PEDV在细胞内的增殖;而在利用RNA干扰技术敲低宿主细胞中内源性pIgR的表达以及缺失内源性pIgR的LLC-PK1ΔpIgR细胞系中,PEDV的N蛋白、病毒mRNA拷贝数和病毒滴度均显著下降,表明敲低和缺失pIg R表达后可抑制PEDV的增殖,由此,我们推测pIgR可能在PEDV感染复制过程中发挥重要作用。为了分析PEDV感染后调控p IgR表达的分子途径,通过检测发现PEDV感染后TNF-α的mRNA明显上调,当采用不同剂量的TNF-α处理LLC-PK1细胞后,发现随着TNF-α剂量的增加pIgR表达量也显著上调;当用NF-κB抑制剂BAY11-708处理后,TNF-α对p IgR的表达则受到明显抑制,表明NF-κB介导的信号途径参与调控pIgR的表达。进一步分析PEDV感染后对NF-κB信号通路中关键分子的影响,结果显示,当PEDV感染18小时后,NF-κB经典途径中的IkB-α、p65和替代途径中的p100、P-p100和p52均呈下调表达,据此我们推测PEDV感染可能通过抑制NF-κB信号通路下调p IgR的表达。此外,我们利用蛋白酶抑制剂MG132处理细胞后检测了pIgR的变化情况,结果显示在MG132存在情况下,pIgR蛋白水平并没有得到有效恢复,表明PEDV感染并非通过泛素蛋白酶体途径降解p IgR。本研究重点分析了在粘膜免疫反应具有重要作用的pIgR蛋白在PEDV感染中的作用,发现pIgR的异常表达会影响PEDV的体外增殖,证实PEDV感染可通过影响NF-κB信号通路调控宿主细胞内pIgR的表达,为深入了解PEDV的致病机理提供了新的理论依据。