【摘 要】
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目的:设计制备乳铁蛋白和麝香酮共修饰脂质体,研究其理化性质并对脑胶质瘤进行初步的体内和体外评价。方法:采用薄膜分散法制备乳铁蛋白和麝香酮共修饰脂质体,并对其进行粒径和电位等方面的相关表征。采用流式细胞仪定量和荧光显微镜定性考察U87-MG细胞和h CMEC/D3细胞对PEG-LP-C6,Lf-LP-C6,Lf-LP-Mu-C6和Lf-LP-C6+Mu的摄取效率和初步机制。采用MTT法研究不同浓度下
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目的:设计制备乳铁蛋白和麝香酮共修饰脂质体,研究其理化性质并对脑胶质瘤进行初步的体内和体外评价。方法:采用薄膜分散法制备乳铁蛋白和麝香酮共修饰脂质体,并对其进行粒径和电位等方面的相关表征。采用流式细胞仪定量和荧光显微镜定性考察U87-MG细胞和h CMEC/D3细胞对PEG-LP-C6,Lf-LP-C6,Lf-LP-Mu-C6和Lf-LP-C6+Mu的摄取效率和初步机制。采用MTT法研究不同浓度下游离多西紫杉醇及载多西紫杉醇脂质体对体外U87-MG细胞的毒性;用U87-MG细胞构建裸鼠原位脑胶质瘤模型,采用荧光活体成像技术研究PEG-LP-Di R,Lf-LP-Di R,Lf-LP-Mu-Di R和Lf-LP-Di R+Mu的体内靶向性和离体组织器官分布情况。用U87-MG细胞构建裸鼠异位脑胶质瘤模型,尾静脉注射PEG-LP-DTX,Lf-LP-DTX,Lf-LP-Mu-DTX和Lf-LP-DTX+Mu研究体内抗肿瘤作用。结果:PEG-LP-DTX的平均粒径在110 nm左右,平均Zeta电位在-35 m V左右,DTX包封率为87.6%,载药量为2.06%。经乳铁蛋白修饰后Lf-LP-DTX和Lf-LP-Mu-DTX的粒径在145 nm左右,Zeta在电位-30 m V;DTX包封率分别为79.27%和81.68%,载药量为1.67%和1.79%;平均每个脂质体表面连接的28个乳铁蛋白分子。U87-MG细胞对Lf-LP-C6,Lf-LP-Mu-C6和Lf-LP-C6+Mu的摄取效率分别是PEG-LP-C6的1.4倍、3.8倍和1.7倍。h CMEC/D3细胞对Lf-LP-C6,Lf-LP-Mu-C6和Lf-LP-C6+Mu的摄取效率分别是PEG-LP-C6的1.2倍、2.9倍和1.5倍。HE染色验证结果显示正常细胞与肿瘤细胞有明显的分界线,表明原位脑肿瘤模型构建成功。裸鼠活体和脑组织成像结果显示,乳铁蛋白修饰的脂质体组在脑肿瘤部位的荧光强度明显高于未修饰组;麝香酮和乳铁蛋白共修饰脂质体组在脑肿瘤部位的荧光强度明显高于乳铁蛋白修饰脂质体组。游离DTX,PEG-LP-DTX,Lf-LP-DTX和Lf-LP-Mu-DTX对U87-MG细胞的增殖抑制呈浓度依赖;游离DTX,PEG-LP-DTX,Lf-LP-DTX和Lf-LP-Mu-DTX对U87-MG细胞的IC50分别为32.2mg/ml,9.6mg/ml,5.5mg/ml,3.3mg/ml。PEG-LP-DTX,Lf-LP-DTX和Lf-LP-Mu-DTX对U87-MG细胞的抗增殖效率明显高于游离DTX。体内脑胶质瘤抑制实验显示,PEG-LP-DTX,Lf-LP-DTX和Lf-LP-Mu-DTX对脑胶质瘤的相对肿瘤增值率分别为28.08%,32.54%,18.66%和23.39%,均低于42%,有较好的抗肿瘤作用。除生理盐水组外脂质体组裸小鼠体重均未增加。结论:乳铁蛋白和麝香酮共修饰载多西紫杉醇脂质体可跨过血脑屏障并且能高效抑制脑肿瘤细胞的增殖和胶质瘤的生长,有望成为脑胶质瘤靶向给药系统的良好载体。
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