论文部分内容阅读
抗磷脂抗体综合症（APS）是一类累及多器官、系统的自身免疫病,以动静脉血栓形成、习惯性流产为主要特征,同时患者血中存在抗磷脂抗体（APA）。自从发现β2糖蛋白1（β2GPⅠ）是APS的一种自身免疫原以来,β2GPⅠ引起了研究者的广泛注意。现已知β2GPⅠ是高度糖基化的单链血浆蛋白,是APA（anti-β2GPⅠ）主要的靶抗原。具有血栓形成和习惯性流产的病人血清中可以检测到高滴度anti-β2GPⅠ,并与血栓形成有极强相关性。在APS进展中很重要的致病性anti-β2GPⅠ所识别β2GPⅠ的特异性表位似乎存在第一结构域。anti-β2GPⅠ可识别、损伤和/或激活在血栓形成中起关键作用的血管内皮细胞。β2GPⅠ作为APS的主要靶抗原可开发为APS耐受原。本文用原核表达系统克隆表达、纯化并鉴定了rhβ2GPⅠ及其第一结构阈二聚体（rhβ2GPⅠDⅠ2）;探讨APS患者血清对内皮细胞HUVEC/EA.hy926表达ICAM-1、MCP-1及E-selectin的影响;观察不同浓度的rhβ2GPⅠ/rhβ2GPⅠDⅠ2对APS患者血清诱导HUVEC表达三种分子的抑制作用。以口服低剂量rhβ2GPⅠ和静脉注射rhβ2GPⅠDⅠ2诱导β2GPⅠ免疫的APS小鼠模型发生免疫耐受,并检测了免疫耐受小鼠免疫反应变化。结果表明:构建表达的rhβ2GPⅠ和rhβ2GPⅠDⅠ2具有hβ2GPⅠ的抗原性;anti-β2GPⅠ阳性的APS患者血清可激活体外培养的内皮细胞;rhβ2GPⅠ及rhβ2GPⅠDⅠ2均可抑制APS血清对体外培养的HUVEC的激活作用。口服低剂量rhβ2GPⅠ和静脉注射rhβ2GPⅠDⅠ2两种方法均成功诱导APS小鼠发生免疫耐受,针对β2GPⅠ的特异性免疫反应受到抑制。本文首次采用rhβ2GPⅠ/rhβ2GPⅠDⅠ2处理APS血清的方法,证明anti-β2GPⅠ为APS的原因性致病因素,大部分致病性anti-β2GPⅠ所识别的β2GPⅠ特异性表位存在第一结构域。首次以口服rhβ2GPⅠ,静脉注射rhβ2GPⅠDⅠ2成功诱导了实验性APS小鼠免疫耐受,以rhβ2GPⅠ和rhβ2GPⅠDⅠ2作为耐受原研究了与APS的相关性,为开发APS耐受原提供了实验基础和理论依据。