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四氮唑类是目前在生物化学及细胞生物学方面应用很广泛的生物染色剂,主要用于检测脱氢酶及与氧化还原相关的其它酶的活性、细胞毒性及增殖分析、植物选种等。四氮唑盐本身及其还原态formazan均无毒,可以直接进行生物体的活体分析和体内分析。目前国内尚无四氮唑盐类生物染色剂的生产,完全依赖进口,对其合成的研究对于填补国内空白及增强我国自产医学关键试剂在国际上的竞争力具有非常重要的意义。
我们对该类产品的合成工艺进行了研究,采用的合成工艺如下:由苯甲醛和苯肼或对硝基苯肼合成苯甲醛苯腙或对硝基苯甲醛苯腙,然后再和相应的芳胺的重氮盐反应得到四氮唑盐的中间体formazan。然后再将formazan氧化,得到相应的四氮唑盐。其结构均经过熔点、瓜光谱及NMR得到确证。
采用上述工艺合成的5种四氮唑类生物染色剂包括:2-对碘苯基-3-对硝基苯基-5-苯基氯化四氮唑、2,5-二苯基-3-(1-萘基)氯化四氮唑、33-二甲氧基-4,4’-二苯撑-3”。3”’-双(2-对硝基苯基-5-苯基氯化四氮唑)、4,4’-二苯撑-3”,3-双(2,5-二苯基氯化四氮唑)和33’-二甲氧基-4,4’-二苯撑-3”,3-双(2,5-二苯基氯化四氮唑),部分产品已经过中试,为工业化生产提供了一条可供选择的途径。
对芳香腙制备、芳香胺的重氮化及formazan中间体制备过程中的各种条件进行了优化,并首次使用Cl<,2>作为氧化剂将formazan中间体氧化成四氮唑盐,相对于文献采用的四醋酸铅氧化法,简化了反应条件,提高了反应收率。