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植物病原菌物种多样性丰富,可产生不同结构类型及不同生物活性的次级代谢产物,它们有些在病菌的致病过程中起关键作用,而有些具有抗菌、抗肿瘤、抗虫等重要生物活性。目前,国内外对一些植物病原菌产生的次级代谢产物组成成分了解甚少,严重制约了人们对病原菌的致病机制的认识及对其开发利用。因此,进一步开展植物病原菌次级代谢产物的研究,对阐明其致病因子及创制新型人用药物或生物农药具有重要的意义。
本论文采用常压柱层析、TLC、HPLC等分离与分析方法以及1D NMR、2DNMR、MS、HR-MS、IR和UV等现代波谱技术,对三株植物病原真菌的次级代谢产物进行了研究,共分离鉴定了33个化合物,其中12个新化合物。
从玉米大斑病菌(Setosphaeria turcica)的PDA培养基发酵产物中分离得到3个化合物,其中2个为萜类化合物(LXK-01-047-01,LXK-01-054-01),1个为萜类的糖苷衍生物(LXK-01-053-01),且化合物LXK-01-053-01是新结构。
从番茄早疫病菌(Alternaria solani)的PDA培养基发酵产物中分离得到16个化合物,包括1个黄酮类化合物(LXK-01-059-01);1个苯乙酸衍生物(LXK-01-060-01);6个异香豆素衍生物(LXK-01-067-01,LXK-01-077-02,LXK-01-082-01,LXK-01-083-01,LXK-01-085-01和LXK-01-094-01);1个呋喃酸类化合物(LXK-01-074-01);2个苯甲酸衍生物(LXK-01-076-02和LXK-01-077-01);1个联苯类化合物(LXK-01-080-01);2个萜类化合物(LXK-01-079-01和LXK-01-080-02);1个鞘脂类化合物(LXK-01-085-02);1个苯并吡喃酮衍生物(LXK-01-087-01),其中化合物LXK-01-077-01和化合物LXK-01-079-01为新结构。
从芦笋茎枯病菌(Phomopsis asparagi Sacc)的PDA培养基发酵产物中分离得到14个化合物,包括3个苯甲酸类衍生物(LXK-01-097-01,LXK-01-097-01,LXK-01-127-01);1个环二肽类化合物(LXK-01-098-01);6个Rubralides系列化合物(LXK-01-099-01,LXK-01-110-02,LXK-01-120-01,LXK-01-120-02,LXK-01-122-01,LXK-01-135-01);1个苯乙酸(LXK-01-104-01);2个异苯并呋喃酮类化合物(LXK-01-111-01,LXK-01-111-02);1个倍半萜类化合物(LXK-01-130-01)。其中LXK-01-097-01、LXK-01-097-01、LXK-01-099-01、LXK-01-110-02、LXK-01-120-02、LXK-01-122-01、LXK-01-127-01、LXK-01-130-01和LXK-01-135-01等9个化合物为新化合物。
分别采用滤纸片扩散法和MTT法测定新化合物的抗菌活性和细胞毒活性。结果表明,在浓度为20μg/片时,化合物LXK-01-110-02对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌有微弱的拮抗活性;在浓度为10μmol/L时,化合物LXK-01-097-01、LXK-01-110-02、LXK-01-120-02、LXK-01-122-01、LXK-01-130-01、LXK-01-135-01对LnCap细胞有弱细胞毒活性,LXK-01-097-01和LXK-01-110-02对A549细胞有弱细胞毒活性,在浓度为20μmol/L时,化合物LXK-01-110-02对BGC823细胞有中等程度的细胞毒活性。
研究结果表明,植物病原真菌次级代谢产物种类丰富,结构新颖,是研究开发微生物药物的重要资源。