研究背景 种植义齿是由种植体和种植体支持的上部结构组成的特殊修复体。对于采用常规义齿修复难以得到足够支持、固位和稳定的患者，种植义齿有明显的优越性。 自二十世纪六十年代起，钛作为一种较理想的牙种植生物材料应用于临床。为了获得种植体在体内长期有效的存留，人们不断从种植材料的种类、性能、生物学特性、种植方案、操作技术，以及术后护理等各个环节进行了大量研究、总结和改进，使人们对种植体的认识不断加深，大大提高了种植义齿临床应用的成功率。 Inoue等在临床上发现种植体周围常常会形成盲袋，种植体界面上不能获得有效牙龈粘膜封闭，长结合上皮移行进入种植体骨界面，破坏骨整合，最终导致种植体松动、脱落。牙种植体贯穿口腔环境及软组织、骨内环境，欲使种植体在口腔环境中行使功能而不损害粘膜下骨组织，就必须保证种植体—牙龈界面的健康，并能防止口腔内细菌等破坏因素侵蚀到颌骨内环境。因此，牙种植体成功的先决条件之一是能够获得附着于种植体颈部表面的口腔粘膜生物屏障。建立并保持这种屏障，主要依赖于口腔再生软组织对种植体体颈部的附着和封闭。 由于牙种植体表面没有牙骨质及牙周膜纤维，结合上皮的生物屏障作用显得浙江大学硕士学位论文20()4特别重要。如果种植体颈部不能形成或保持这种屏障，细菌及其它致炎因子就会侵入组织内环境，引起炎症;并导致附着上皮向根端迁移进入种植体与骨的界面。一旦种植体与骨的界面有上皮组织迁移进入，就会破坏骨整合，导致种植体松动，使种植修复失败。因此，形成并保持穿粘膜处种植体颈部的牙靓上皮屏障完整，对保护骨组织及提高种植成功率极其重要[3，“}。 Jamesl’嗜先证实了结合上皮能通过半桥粒一基板结构附着于钻铬合金种植体表面。以后，更多学者对钦、复合树脂、陶瓷种植体的牙跟上皮界面进行了研究，均发现了半桥粒一基板复合物结构。还有一些学者利用组织化学方法对种植体一上皮组织界面进行了进一步研究，发现结合上皮与种植体之间存在一层含有酸性粘多糖和糖蛋白的无定形物质，与基底膜的组化成分一致。这都证实了在种植体颈部表面能够形成并存在上皮界面16. 71。本课题组也曾经通过透射电镜在动物实验中发现，种植术后15天的纯钦种植体颈部表面有上皮袖口结构，种植体表面上皮细胞可见伪足、半桥粒和基底板结构。但并未作种植术后上皮屏障形成的连续观察[“l。 steflik等101在超微结构水平上，提出了结合上皮形成的动态过程。他认为结合上皮细胞通过分泌性小囊泡，将氨基葡聚糖排出在种植体表面形成基底膜，通过半桥粒一基底板结构使结合上皮粘附在种植体表面形成上皮屏障。 种植术后，半桥粒一基底板复合体是种植体一上皮屏障形成过程中的重要结构。此结构的形成、根向迁移与术后上皮细胞的再生、功能密切相关。上皮屏障形成过程中，上皮细胞附着复合体超微结构及动态形成过程的研究相当明了。但在此过程中，关于上皮细胞再生、增殖状况的研究却不多。 增殖细胞核抗原(prol iferating Cell noelear antigen，PCNA)可作为评价细胞增殖状态的重要指标，它的细胞浓度与细胞再生状态密切有关。检测尸CNA的表达水平能较好地反映细胞进入增殖周期的状况，代表细胞的增殖潜能。 本实验利用动物模型，观察了种植术后种植体颈部牙跟上皮再生、根向迁移、形成结合上皮的连续组织学过程以及在此过程中上皮细胞PCNA的表达变化，探讨种植体一上皮界面形成中上皮细胞的增殖、迁移。浙江大学硕士学位论文2004研究目的(1)观察二段式非埋植型牙种植体非负荷期结合上皮形成过程。(2)观察结合上皮形成过程中，PCNA的表达变化。研究方法(l)建立二段式非埋植型牙种植体动物模型。(2)HE染色观察结合上皮形成过程。(3)超敏S一P免疫组织化学检测PCNA。研究结果(l)种植术后12d见结合上皮开始形成，PCNA呈强阳性表达。(2)1sd上皮细胞增生趋于平稳，PCNA表达显著减弱。(3) 20d形成类似天然牙的上皮附着，维持低水平表达。研究结论(1)纯钦牙种植体周在非负荷期能形成类似天然牙的上皮附着。(2)结合上皮形成过程中，PCNA表达与上皮形成的组织学变化密切相关。