家蚕绵茧突变体差异蛋白组学分析及黄血抑制基因I的精细定位

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家蚕吐丝结茧对于自身的生存以及防御天敌都起到了极其重要的作用,同时茧丝能够为人们所利用,并在丝绸业、商贸业、农业、及文化交流中都发挥了重要的作用。蚕茧由茧衣、茧层、蛹体及蜕皮四部分构成,茧层可用于生产缫丝,蚕茧的外观形状是区分品种的主要标志之一,一般因种而异。在不断的进化历程中,家蚕积累了大量突变体及突变系,其中与蚕茧性状相关的突变体主要有:绵茧、丝胶茧、外层黄茧、绿茧、薄纸茧等,这些突变体是研究茧质性状的重要材料。本论文将主要介绍在探索茧丝形成、营茧行为和茧丝着色机理相关基础信息方面的工作,具体来说包括以下内容:  (1)以结茧性状具有明显差异的正常茧、绵茧、丝胶茧3个家蚕品系个体为材料,利用双向电泳图谱分析技术,对其5龄第3天和第6天幼虫中部丝腺各区段的蛋白质样品分别进行分析,发现在三个家蚕品系同一时期中部丝腺同一区段细胞蛋白质中均可检测到一定数量的特异蛋白斑点。选取一些显著差异蛋白斑点进行基质辅助激光解析电离飞行时间质谱鉴定分析,得到35个可信蛋白质鉴定结果,利用蛋白质相关数据库,查询并分析蛋白相关的功能,这些差异的蛋白质包括参与能量代谢、蛋白质合成等生物学过程的功能蛋白,其中发现丝氨酸蛋白酶抑制剂16(serpinl6)和丝氨酸蛋白酶抑制剂18(serpinl8)可能与家蚕绵茧突变形成相关,这部分实验对于家蚕茧丝品质形成机理的研究具有重要参考价值。  (2)以中系品种KY(黄血黄茧)基因型为:YY+I+I,和欧系品种Ba(白血白茧),为欧一化,基因型为:+Y+Y II,为材料组配F1代及BC1回交群体,(Ba×KY)×KY和KY×(Ba×KY)分别记作BC1F和BC1M。在本实验室先前初步定位的基础上,共筛选出5个SSR标记和1个STS标记共6个多态性标记与I基因连锁,利用BC1M群体构建I基因遗传连锁图,连锁图的图距为12.8cM,将I基因定位于S001和STS48-1标记之间,与I基因最近的标记为STS48-1,遗传距离为0.5cM。最终候选区域缩小至300kb左右,此区间有4个预测基因,目前正对其预测基因进行了测序分析。家蚕黄血抑制基因(I),能阻止类胡萝卜素从中肠进入体液,抑制了黄血基因的表达,从而导致一系列与黄血基因互作控制茧色的基因都不能表达,是天然黄茧系形成过程中的重要控制基因.对于黄血抑制基因(I)的定位分析研究为其图位克隆奠定了基础,进一步为茧丝着色机理的研究提供帮助。
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