尿流式细胞术在移植肾急性排斥反应诊断方面的临床研究

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研究目的: 急性排斥反应对移植肾的近远期存活具有十分重要的影响。随着免疫抑制剂的不断进步,移植排斥反应发生率逐渐降低,长期存活率提高,使肾移植术成为终末期肾病患者的最有效的治疗手段。但是移植肾的急性排斥反应仍是肾移植术后的主要并发症,同时成为慢性排斥反应和移植肾功能损伤的最重要的危险因素。尿流式细胞技术属于无创性检查,具有简单、快速,检测细胞数量大、重复性好、灵敏度高等优点,更适应于临床。故本研究的目的:1、探讨尿流式细胞术对移植肾急性排斥反应诊断的作用;2、进一步验证急性排斥反应患者的尿液中相关CD分子的表达。 材料与方法: 一、选取临床研究对象及标本 63例肾移植术后住院患者为研究对象,标准为:患者血肌酐值升高,并通过两次检验确定;排除泌尿系统感染患者。患者均行血肌酐值、尿液分析、药物浓度监测、移植肾多普勒彩色B超等检查。留取患者清晨洁净的中段尿,密闭保存送至实验室。 二、尿液标本的制备 取洁净新鲜尿液35ml,经天平平衡后离心,去除上层清液,以PBS清洗两次,以FITC、PE结合的单克隆抗体anti-CD14、anti-CD25、anti-CD54、anti-CD103、anti-HLA-DR,及IgG的对照溶液与取出细胞悬浮液融合,再以NH4CL去除红细胞已标记的细胞用甲醛固定并存放。 三、流式细胞分析技术
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