日本脑炎病毒E蛋白酵母双杂交载体的构建及其在酵母菌中的表达

来源 :第四军医大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:aig2008
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日本脑炎,又称为流行性乙型脑炎,是由日本脑炎病毒(JEV)引起的中枢神经系统传染病.为研究JEV受体,研究人员从JEV感染的乳鼠脑内,提取RNA,利用RT-PCR扩增出具有受体结合活性的JEV E蛋白基因片段.并进一步将其克隆入Ras救活系统的ADNS JUN-RAS(61)△F质粒,PCR及酶切鉴定表明重组质粒构建正确.接着用乙酸锂转化法将该重组质粒转入酵母菌cdc25-2.ELISA双抗夹心法检测到有E蛋白的表达,且激活试验阴性,表明可以用此系统来进行JEV受体的研究,并为进一步从敏感细胞cDNA文库钓取JEV受体奠定了基础.
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