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犬细小病毒病是对宠物临床上危害较大的传染病之一,我国徐汉坤在1983年首次报道了犬细小病毒病,虽然该病出现至今只有30年时间,但是该病发病比较急、死亡率比较高,给养犬业带来了严重的经济损失。CPV是单链DNA病毒,但变异速率与RNA病毒相当,目前已经出现了三个亚型,即CPV-2a、CPV-2b、CPV-2c。根据临床症状表现主要分为肠炎型和心肌炎型两种类型。但现在心肌炎型很少见,以肠炎型为主。临床上宠物医院对该病的诊断主要使用进口的胶体金试纸条,成本比较高。本研究旨在建立一种犬细小病毒乳胶凝集快速检测方法,为宠物临床提供一种快速、简单、便宜的检测方法。本研究运用本实验室制备的抗CPV-2b亚型单克隆抗体,致敏羧化乳胶颗粒,用单抗致敏乳胶,摸索偶联的最佳条件,包括致敏的抗体量和致敏时间等。乳胶检测试剂自身稳定、特异性好、敏感度高,最终建立了一种犬细小病毒乳胶凝集检测试剂和检测方法,并对临床样品进行了检测。在武汉市的宠物医院采集了病料150份,其中有91份病料接种F81细胞,提取DNA模板,PCR扩增583bp的片段,经测序后结果显示有72份是CPV-2a亚型(79.1%),9份是CPV-2b亚型(9.9%)。用本研究制备的CPV乳胶凝集检测试剂对采集的临床样品进行了检测,并与胶体金及PCR方法进行了比较。91份用胶体金检测阳性的病料,经细胞传代获得的F1代病毒,用PCR检测阳性率88%,乳胶凝集检测阳性率84%；另外57份病料F0代检测结果：用胶体金和乳胶凝集检测都为阳性的有48份,都为阴性的有4份,两者的符合率为91.23%。综上所述,本研究建立了一种犬细小病毒乳胶凝集快速检测方法,该方法可以检出CPV-2a及CPV-2b的感染,并对临床样品进行了检测。在武汉进行的关于犬细小病毒的分子亚型的调查显示,武汉地区流行的犬细小病毒主要是以CPV-2a亚型为主,并正向CPV-2b亚型进化。本研究为华中地区犬细小病毒病的预防和治疗提供了一定的理论依据,为临床CPV的诊断提供了一种快速检测方法。