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邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(Di-(2-ethylhexyl)phthalate,DEHP),是邻苯二甲酸酯类物质中较为常见和应用最广泛的一种增塑剂,多用于医疗器械和设备、化妆品成分及包装、涂料以及化工合成、食品包装等多种领域。随着时间的推移,DEHP会慢慢的从这些材料中溶出或者迁移出来,并转移至环境中,人体进而通过三个主要途径即:消化道(经口摄入)、呼吸道、和皮肤暴露,影响体内酶的变化从而影响人体的健康。目前关于DEHP毒性的研究多聚焦于生殖毒性和胚胎遗传毒性,以生物转化为靶点研究DEHP肝脏毒性作用的却不多。枸杞是我们所熟悉的一种食物,既可以做食物,又可以当做中药,具有保护肝脏、肾脏以及预防衰老等多种功效。现有研究表明,枸杞中的一种主要活性物质,即枸杞多糖(Lycium barbarum Polysaccharide,LBP)具有缓解氧化应激、保肝护目等作用。本文在研究DEHP染毒致大鼠肝脏毒性、枸杞汁和枸杞多糖对肝脏酶系的影响的基础上,进一步研究LBP对其毒性的解毒作用。首先,通过28天短期重复染毒实验建立DEHP染毒动物模型[对照组:玉米油,DEHP低、中、高剂量分别为:300、1000、3000 mg/(kg·bw)],通过测定氧化指标和肝脏生物转化酶(I相、II相主要酶系等)来观察DEHP的肝脏毒性作用,同时用HPLC检测尿液中邻苯二甲酸单乙基己基酯(Mono(2-ethylhexyl)phthalate,MEHP)和邻苯二甲酸(phthalic acid,PA)观察DEHP动态代谢变化。其次,观察了枸杞汁和枸杞多糖对大鼠肝脏酶系的影响[对照组:生理盐水,枸杞多糖低、中、高剂量组:50、100、200 mg/(kg·bw),枸杞汁低、中、高剂量组:25、50、100 mg/(kg·bw)],通过测定氧化指标和肝脏I相、II相主要酶系等来观察枸杞的保健效果。最后,采用LBP干预DEHP染毒大鼠[对照组:玉米油,LBP组:300 mg/(kg·bw),DEHP染毒组:3000 mg/(kg·bw),LBP低、中、高干预组:DEHP灌胃剂量均为3000 mg/(kg·bw),LBP干预剂量分别为100、200、300 mg/(kg·bw)],通过氧化指标和肝脏I相、II相主要酶系等来观察LBP对DEHP染毒致大鼠肝脏毒性的干预效果,HPLC方法检测尿液中代谢物MEHP和PA含量,同时结合肝脏孕烷X受体(PXR)信号通路进一步探讨LBP对DEHP致肝脏毒性的解毒机制。所有数据采用SPSS 23.0进行分析,主要研究结果如下:(1)DEHP对大鼠的一般毒性作用:高剂量组大鼠体重增长较对照组缓慢,28天染毒结束后,体重极显著低于对照组(P<0.01),食物利用率极显著下降(P<0.01);与对照组比较,DEHP各剂量染毒组大鼠的肝脏系数、肾脏系数均有所升高,并且中、高剂量组大鼠睾丸系数显著降低(P<0.01)。(2)DEHP对大鼠氧化系统的影响:高剂量染毒组大鼠血清和肝脏中SOD、GSH-Px活力均显著低于对照组(P<0.05),MDA含量显著升高(P<0.05或P<0.01),中、高剂量染毒组肝脏中8-iso-PGF2α含量显著升高(P<0.05),各个染毒剂量组的大鼠肝脏组织中均出现了不同程度的病理病变,染毒剂量越高,病理损伤程度越严重。(3)DEHP对大鼠肝脏生物转化酶及其代谢的影响:各染毒剂量组大鼠肝脏中CYP450、CYP2E1及CYP3A1的含量显著高于对照组(P<0.05或P<0.01),且染毒剂量越高,细胞色素酶含量升高越显著;高剂量染毒组GST含量显著高于对照组(P<0.01),中剂量和高剂量染毒组UGT1含量、各个剂量染毒组GST-pi、蛋白激酶(PKA)、蛋白磷酸酶(PP)及PXR含量显著升高(P<0.05或P<0.01)。各剂量染毒组大鼠血清中MEHP含量随着染毒剂量的增大而升高,中、高剂量染毒组MEHP含量显著高于对照组(P<0.01);尿液中MEHP和PA含量均在染毒第7天时最高,其含量和染毒剂量呈现一致的趋势,第7天后降低。(4)枸杞多糖和枸杞汁能够增强正常大鼠血清中GSH-Px活力(P>0.05),且GSH-Px活力在枸杞多糖高剂量组最高。(5)LBP对DEHP染毒大鼠一般毒性的影响:LBP各剂量干预组大鼠体重、食物利用率和睾丸系数均高于DEHP染毒组(P>0.05);肝脏系数和肾脏系数则低于DEHP染毒组(P>0.05)。(6)LBP对DEHP染毒大鼠氧化系统的影响:LBP各剂量干预组大鼠血清和肝脏中ROS均低于DEHP染毒组(P>0.05),GSH-Px和SOD活力则高于DEHP染毒组(P>0.05)。(7)LBP对DEHP染毒大鼠肝脏生物转化酶的影响:LBP各干预组CYP450、CYP2E1和CYP3A1含量显著低于DEHP染毒组(P<0.05),UGT1、GST、GST-pi、PKA、PP及PXR含量与DEHP染毒组比较,虽有所降低,但并无显著性差异(P>0.05)。(8)LBP对DEHP染毒大鼠肝脏孕烷X受体及其下游调控因子II相解毒酶mRNA表达的影响:与对照组比较,枸杞多糖各剂量干预组PXR mRNA、GST mRNA和UGT1mRN A表达水平均有所降低,且LBP高剂量干预组表达水平降低具有显著性差异(P<0.05)。(9)LBP对DEHP染毒大鼠代谢的影响:与DEHP组比较,LBP各剂量干预组血清和染毒第7天尿液中MEHP含量均显著降低(P<0.05或P<0.01),LBP各剂量干预组在染毒第7天时的尿液中PA含量高于DEHP单纯染毒组(P>0.05)以上结果表明,DEHP具有致大鼠肝脏氧化损伤等毒性作用,虽然枸杞汁和枸杞多糖对于正常大鼠没有显著性的影响,但是LBP可能通过PXR信号通路介导I相、Ⅱ相解毒酶mRNA的表达来减轻DEHP染毒所致的肝脏毒性作用以达到解毒目的。