论文部分内容阅读
以往的研究显示神经损伤或高频刺激(high-frequency stimulation,HFS)既可诱导C-纤维诱发电位的LTP,又能产生病理性疼痛;科研上也常常采用各种神经损伤的模型来研究神经病理性疼痛。大量研究证实脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)参与神经病理性疼痛过程;我们最近也报道了BDNF诱导出脊髓C-纤维诱发电位的晚期LTP。然而临床研究报道腓肠神经损伤或利用带腓肠神经皮瓣进行移植时后并不产生慢性疼痛,具体机制未明。因此,本研究首先采用电生理细胞外记录技术及痛行为学观察损伤坐骨神经的不同分支[胫神经(tibial,混合神经)/腓肠肌-比目鱼肌神经(GS,支配肌肉)或腓肠神经(sural,支配皮肤)]在诱导脊髓LTP及痛行为学上是否存在差异,然后通过荧光免疫组化免疫和Westen Blot等方法观察各组神经损伤后不同时间L4-5脊神经节(DRG)中BDNF的表达,再结合荧光金(Fluorogold,FG)逆行追踪技术和ATF-3共同标记受损的神经来探讨不同神经内BDNF的表达情况及其意义。
结果:(1)与剪断tibial/GS不同,只剪断Sural不引起同侧足底的机械过敏,即在动物模型上复制出了临床皮神经损伤不产生病理性疼痛的现象。(2)HFS或剪断tibial/GS诱导C-纤维诱发电位L-LTP而单独刺激或剪断sural神经只引起E-LTP;测试刺激tibial/GS,而HFS sural神经不能引起异位LTP,但测试刺激放在sural神经,HFS tibial/GS均可引起sural神经的异位LTP。(3)给予TrkB-Fc(BDNF的清道夫)能阻断HFS tibial引起的晚期LTP;低浓度的BDNF(10 pg/ml)不影响sural C-纤维的诱发电位,但能易化HFS刺激sural神经诱导的LTP,使E-LTP转变成L-LTP,这说明纯感觉纤维的sural神经不引起L-LTP可能是由于sural神经中的BDNF表达少或不表达。(4)免疫组化及Western blot结果显示:剪断GS7d后的疼痛模型同侧L5 DRG BDNF表达增强,并且上调的BDNF主要见于受损的GS神经元;但单纯剪断sural不引起同侧L5 BDNF表达的上调,即便有少量的BDNF表达,也只见于未受损伤的神经元中即非sural神经元。
结论:不同类型神经(皮神经或混合性神经)损伤在引起痛行为学和C-纤维诱发电位LTP上均存在差异,而这种差异与神经内BDNF表达量存在着直接的关系:即混合神经或支配肌肉的神经损伤不仅引起LXP和慢性疼痛,而且神经内的BDNF表达上调;而支配皮肤的腓肠神经损伤不引起晚期LXP与疼痛是由于该神经内BDNF量少所致,这进一步明确了BDNF在引起病理性疼痛中的重要作用。