针刺脑保护作用的机制探讨和临床应用

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目的:探讨电针预处理对脑缺血/再灌注小鼠海马及皮质区神经元单磷酸腺苷激活蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)、神经行为学评分、神经元凋亡及其凋亡蛋白Bax、caspase-9、caspase-3表达的影响。方法:健康雄性C57BL6小鼠80只,7周龄,采用随机数字表法,将其随机分为5组:空白对照(N)组:对小鼠不施加任何处理措施;假手术(S)组:仅分离双侧颈总动脉作对照;脑缺血/再灌注(I/R)组:建立脑缺血模型前无电针预处理;电针百会穴(EA+I/R)组:建立模型前行电针百会穴预处理;电针无关穴位(SEA+I/R)组:建立模型前针刺百会穴旁2mm处以作对照。针刺方式:选取“百会”穴,在建立脑缺血/再灌注模型前使用0.25mm×40mm的毫针,于头顶部两耳连线中点沿皮平刺入2mm,选取疏密波,强度1mA,频率2/15Hz,以小鼠胡须轻微抖动作为针刺有效的标志,每天1次,每次持续30min,持续5天,待最后一次电针刺激结束后24小时,建立有效的前脑缺血模型。对SEA+I/R组小鼠,针刺百会穴旁2mm,其他处理与EA+I/R组相同。采用双侧颈总动脉阻塞(bilateral common carotid artery occlusion,BCCAO)法建立前脑缺血模型,脑缺血15min再灌注。观察指标:(1)神经行为学评分:3天后对所有小鼠行神经行为学评分;(2)海马及皮质区神经元形态、凋亡神经元计数:对小鼠行神经行为学评分后,每组随机取8只行甲醛固定后制作石蜡切片,HE染色观察海马及皮质神经元形态,TUNEL法检测凋亡神经元;(3)海马及皮质区总AMPK、pAMPK、Bax、caspase-9、caspase-3蛋白的表达:每组其余8只提取新鲜海马及皮质脑组织,PCR法测AMPK2mRNA的表达,western blot法测总AMPK、pAMPK、Bax、caspase-9、caspase-3蛋白的表达。结果:(1)与N组和S组比较,I/R组、EA+I/R组、SEA+I/R组的神经行为学评分显著升高(P<0.05),海马、皮质区凋亡细胞和Bax、caspase-9、caspase-3表达也升高(P<0.05), pAMPK蛋白水平升高(P<0.05)。(2)与I/R组、SEA+I/R组相比,EA+I/R组神经行为学评分降低(P<0.05),海马、皮质区凋亡细胞和Bax、caspase-9、caspase-3表达降低(P<0.05),pAMPK蛋白水平升高(P<0.05)。(3)各组间AMPK2mRNA及总AMPK蛋白的表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论:电针预处理能激活脑缺血/再灌注小鼠海马及皮质区AMPK,升高pAMPK水平,发挥脑保护作用。目的:探讨针刺对老年髋关节置换术患者血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)、S-100β蛋白浓度与术后认知功能障碍之间的关系。方法:一般资料:86例择期腰麻-硬膜外联合阻滞麻醉下行髋关节年患者,年龄70-80岁,体重48-89公斤,ASA分级Ⅱ~Ⅲ级,手术中镇痛完善,咪达唑仑镇静。随机分为2组:对照组(N组)46例,观察组(针刺组A组)40例。观察项目:(1)运用简易智能量表(mini-mental state examination, MMSE)对患者于术前1天(T0),术后3天(T1)及术后7天(T2)进行认知功能评分。(2) POCD:比较两组术后3天(T1)及术后7天(T2)POCD的发生率;(3) NSE、S-100β蛋白的浓度:两组患者麻醉前(t0)、术后6小时(t1)、术后24小时(t3)及48小时(t4)分别抽取静脉血,监测NSE、S-100β血清浓度;(4)比较两组手术时间,术中咪达唑仑用量、输液量、出血量、尿量、阿托品及麻黄碱使用率及其他严重并发症。结果:(1) POCD:与N组相比,A组在术后T1及T2时POCD发生率明显降低(P<0.05);(2) NSE、S-100β蛋白的浓度:与N组相比,A组血清NSE浓度在t2-t4时降低(P<0.05),S-100β蛋白的浓度在t1-t4时降低(P<0.05);组内比较,N组NSE在t2-t4时较t0时升高, S-100β蛋白浓度在t1-t4时较t0时升高。A组血清NSE浓度在t2、t3时较t0时升高(P<0.05),S-100β蛋白浓度在t1、t4时较t0时升高(P<0.05),(3)两组手术时间、术中咪达唑仑用量、输液量、出血量、尿量、阿托品及麻黄碱使用率差异无统计学意义(P>0.05);并且两组均没有严重的并发症。结论:针刺能够降低老年髋关节置换术患者血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)、S-100β蛋白,改善术后认知功能,有利于患者康复。
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