【摘 要】
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目的:本实验旨在诱导构建功能性消化不良(functional dyspepsia,FD)大鼠模型,采用腹腔注射芍药苷(paeoniflorin,Pae)对FD大鼠模型进行治疗,进而探讨芍药苷对FD大鼠胃肠功能的
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目的:本实验旨在诱导构建功能性消化不良(functional dyspepsia,FD)大鼠模型,采用腹腔注射芍药苷(paeoniflorin,Pae)对FD大鼠模型进行治疗,进而探讨芍药苷对FD大鼠胃肠功能的影响,并明确其相关作用机制。方法:在本实验中,我们使用碘乙酰胺(iodoacetamide,IA)诱导构建IA-FD大鼠模型以及可乐定(clonidine,CD)诱导构建CD-FD大鼠模型;通过检测大鼠胃顺应性、胃敏感性和胃排空率来评价动物模型构建成功与否;检测了大鼠下丘脑和胃组织中乙酰胆碱酯酶(acetyl cholinesterase,Ach E)和血清中乙酰胆碱(acetylcholine,Ach)活性;通过免疫荧光实验(immunofluorescence,IF)检测大鼠胃组织中环氧化酶-2(COX-2)的蛋白表达;通过蛋白免疫印迹实验(western blot,WB)检测大鼠十二指肠中紧密连接蛋白Occludin、ZO-1和黏附连接蛋白E-cadherin的蛋白表达。结果:1、胃顺应性检测:在IA-FD模型与CD-FD模型中,在20mm Hg压力下,各处理组大鼠胃顺应性无明显差异(P>0.05);在40mm Hg-80mm Hg压力下,与Sham组相比,模型组胃顺应性明显降低(P<0.01),与模型组相比,不同浓度芍药苷治疗组胃顺应性均显著升高(P<0.05)。2、胃敏感性检测:在IA-FD模型与CD-FD模型中,与Sham组相比,模型组胃敏感性显著升高(P<0.01);与模型组相比,不同浓度芍药苷治疗组胃敏感性明显降低(P<0.05)。3、胃排空率实验:在IA-FD模型中,模型组的胃排空率与Sham组相比有显著性差异,模型组明显低于Sham组(P<0.01),与模型组相比,IA-FD+15mg/kg/d Pae治疗组胃排空率升高(P<0.05)。在CD-FD模型中,与Sham组相比,模型组胃排空率降低(P<0.01),具有显著性差异,与CD-FD模型组相比,不同浓度芍药苷治疗组胃排空率均升高(P<0.05)。4、血清中Ach活性:在IA-FD模型中,与Sham组相比,模型组大鼠血清中Ach活性明显降低(P<0.01),与模型组相比,IA-FD+30mg/kg/d Pae组大鼠血清中Ach活性显著升高(P<0.05)。在CD-FD模型中,与Sham组相比,模型组大鼠血清中Ach活性显著降低(P<0.01),与模型组相比,不同浓度芍药苷治疗组Ach活性均明显升高(P<0.05)。5、下丘脑和胃中Ach E活性:在IA-FD模型中,各组大鼠下丘脑和胃组织中Ach E活性无显著性差异(P>0.05)。在CD-FD模型中,与Sham组相比,模型组大鼠下丘脑和胃中Ach E活性升高(P<0.01),与模型组相比,不同浓度芍药苷治疗组大鼠下丘脑和胃中Ach E活性均降低(P<0.05)。6、免疫荧光实验:在IA-FD和CD-FD两种模型中,Sham组中COX-2表达量少,与Sham组相比,模型组COX-2表达量明显增多,与模型组相比,不同浓度芍药苷治疗组COX-2表达量明显减少。7、Western blot实验:在IA-FD和CD-FD两种模型中,与Sham组相比,模型组大鼠十二指肠中Occludin蛋白表达量明显减少(P<0.01),与模型组相比,30mg/kg/d Pae治疗组大鼠Occludin蛋白表达量增多(P<0.05)。在IA-FD和CD-FD两种模型中,与Sham组相比,模型组大鼠十二指肠中ZO-1蛋白表达量显著减少(P<0.01),与模型组相比,30mg/kg/d Pae治疗组ZO-1蛋白表达量明显增多(P<0.05)。结论:芍药苷能够有效提高FD大鼠的胃排空率和胃顺应性,降低胃敏感性,从而改善FD大鼠的胃动力障碍;芍药苷可能是通过上调Ach的活性,抑制Ach E活性,进而促进胃肠动力来治疗FD;芍药苷可能通过改善FD大鼠胃中炎症,增强肠粘膜的完整性,发挥其对FD的治疗作用。
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