中药平瘤康治疗胶质瘤作用机理的实验研究

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目的:本研究利用“中药血清药理学”方法,观察中药平瘤康体外对C6胶质瘤细胞增殖抑制作用,并进一步从细胞动力学方面探讨中药平瘤康抗肿瘤的作用机制。方法:实验一、根据血清药理学方法,将清洁级wistar大鼠随机分为两组,灌服平瘤康汤剂或生理盐水,制备血清。根据血清添加量的不同,将上述方法获取的血清分为2.5%,5%,10%和20%四组。各组分别干预C6胶质瘤细胞24h、48和72h。用倒置显微镜观察不同时期的肿瘤细胞生长情况。采用MTT法,观察不同血清添加量不同时间对C6胶质瘤细胞增殖的影响。实验二、根据实验一的结果,选取抑制作用最强的两个血清添加量组,即10%和20%组和抑制作用最明显的两个时间段,即48h和72h。继续培养C6胶质瘤细胞,收集足够量的细胞,上流式细胞仪检测,分析细胞周期的分布。结果:1.光镜下,中药组可见有细胞凋亡的典型形态学变化出现,如细胞体积缩小、变圆等,空白对照组和对正常血清照组则少见有凋亡形态的细胞出现。随着血清添加量的增加,平瘤康对C6胶质瘤细胞抑制效应逐步增加。2.当用10%的血清添加量干预48h后,与正常血清对照组相比,中药干预组的G0/G1期细胞构成比变化不明显(P>0.05),S期细胞构成比则减少(P<0.05)。当用20%的血清添加量干预48h后,与正常血清对照组相比,中药干预组的G0/G1期细胞构成比增加(P<0.05),S期细胞构成比则减少(P<0.01)。当用10%的血清添加量干预72h后,正常血清对照组的细胞周期分布呈典型的恶性肿瘤特征,与之相比,中药干预组的G0/G1期细胞构成比增高(P<0.05),而S期细胞构成比明显减少(P<0.01)。当血清添加量增加到20%时,细胞周期分布变化更为明显,G0/G1期细胞构成比明显增加(P<0.01),S期细胞构成比明显减少(P<0.01)。结论:1.实验一研究表明中药平瘤康体外能抑制C6胶质瘤细胞增殖,平瘤康对胶质瘤的抑制效应呈现量效关系。2.实验二研究表明中药平瘤康组C6胶质瘤细胞合成前期(G1期)细胞的构成比较正常血清对照组高,合成期(S期)细胞的构成比较正常血清对照组低。研究结果表明中药平瘤康能阻滞C6胶质瘤细胞从G1期到S期的进程,降低瘤细胞的增殖能力。
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