试纸法快速检测茶多酚的建立及其应用研究

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茶多酚又称茶鞣或者查单宁,占茶叶干重的30%。他是形成茶叶色香味的主要成分之一,也是茶叶中有保健功能的主要成分之一。在相关保健品中,茶多酚是衡量其质量好坏的主要指标之一。茶多酚的传统检测方法虽然比较精准,但要么操作复杂繁琐、费时费力、无经济性、成本过高,受到大型实验仪器或者专业技术操作人员的制约,要么所用试剂对环境不友好,无论是从经济性还是快速性以及方便性来说都无法满足实时现场检测的要求。所以,发展一种快速、简便的茶多酚检测方法来实现实时现场检测就迫在眉睫。因此,本文针对传统茶多酚检测过程中的不足,提出并建立了新的检测方法,主要结果如下:(1)基于亚铁离子、柠檬酸根离子和茶多酚会反应形成蓝紫色的异配体三元络合物,络合物性质稳定而且颜色深浅和茶多酚浓度呈正相关的性质,建立了柠檬酸亚铁分光光度法测定保健品中茶多酚含量的新方法。由柠檬酸亚铁组成的显色剂与茶多酚溶液反应后颜色发生明显变化,最大吸收峰在545nm,络合反应在5分钟之内即可达到最大,可以实现快速检测。经过一系列优化实验,茶多酚浓度在0~100mg/L的范围内符合比尔定律,相关系数R2=0.9997,具有很好的线性相关,回归方程为Y=0.00573+0.02885X,本方法的平均加标回收率达99.12%,RSD<0.5%精密度高,稳定性好。应用于保健品中茶多酚检测的实验结果与高效液相色谱结果对比相一致,准确度令人满意,可以应用于保健品中茶多酚含量的快速检测。(2)对试纸法快速测定保健品中茶多酚做了预先探索,通过探索实验,确定了最佳显色剂为柠檬酸亚铁,并且解决了柠檬酸亚铁试纸显色迟缓的难题,使用壳聚糖防止了显色剂的外溢,配合使用3%的壳聚糖以及人为添加二氧化碳内环境保护显色剂在检测过程中不被氧化,解决了亚铁显色剂抗氧化的问题。(3)完善了显色试纸的制作流程并探索试纸与茶多酚反应的最佳条件,建立柠檬酸亚铁试纸法检测茶多酚的新方法。经过探索优化实验,在pH 7~8的情况下,柠檬酸亚铁和茶多酚反应形成的三元络合物在5分钟内稳定并达到最大量,并且试纸颜色深浅与样品中茶多酚浓度成正比。将显色试纸与标准色阶对比,得出茶多酚的浓度。通过对七种样品中茶多酚含量的测定并与HPLC法测定比较发现,本方法可对茶多酚进行半定量分析,经稳定性实验和干扰实验发现,试纸稳定性和抗干扰能力良好。由此可见,所研制的茶多酚检测试纸具有经济、简单快速、方便携带、准确稳定等特点,可应用于保健品样品中茶多酚的实时、快速检测,具有广阔的推广应用前景。
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