目的:通过建立大鼠组织中血管内皮生长因子实时荧光定量PCR检测方法以及Ⅱ型胶原诱导型关节炎大鼠模型,评价雷公藤多苷对VEGF mRNA在不同组织中表达水平的影响,探讨其治疗类风湿关节炎的可能作用机理。方法:1.跨内含子设计引物和TaqMan探针,验证种属特异性,在ABI7500实时荧光循环仪上建立检测方法,扩增片段TA克隆,测序并制作标准品,分析其特异性、灵敏性和重复性。2.建立大鼠Ⅱ型胶原性关节炎(CIA)模型,将造模成功大鼠45只随机分为三组:模型对照组、雷公藤多苷片组、沙利度胺片组,选10只健康大鼠为正常组,共四组。均灌胃给药。自造模起隔天检测关节炎指数积分和关节肿胀度;给药4周后检测大鼠肺脏、心脏、肝脏、肾脏和关节滑膜组织中VEGFmRNA表达。结果:1.测序及电泳条带证实PCR反应的特异性,批内CV(变异系数)为2.0-6.7%,批间CV值为3.5-10.6%,标准品线形范围为6.6x10~7-6.6x10~0 copies/ul,r＞0.99。2.实验表明:用药4周后,雷公藤多苷片组、沙利度胺片组动物关节炎评分和关节肿胀度均低于模型组(P＜0.01)。雷公藤多苷片组对大鼠不同部位组织中VEGF mRNA表达水平降低与模型组比较有显著差异(P＜0.05),与沙利度胺片组无差异(P＞0.05)。结论:本研究成功建立了检测VEGF的实时荧光定量PCR方法,具有高灵敏、高特异、高重复性的特点。雷公藤多苷可以通过降低VEGF表达水平抑制血管过度生成从而发挥抗类风湿关节炎作用。