SATB1(Special AT rich sequence binding protein 1)是一种核基质结合蛋白,它的表达具有一定的组织特异性和时间特异性。近年来研究发现,SATB1在多种肿瘤细胞中过表达,通过改变多种基因的调控从而发挥着重要的作用,并且这种表达与肿瘤的迁移和增殖等行为相关。尼克酰胺是水溶性维生素B3的一种成分,它可以改变细胞的生存方式,并能诱导一些肿瘤细胞的的凋亡。本研究主要是通过荧光定量PCR、蛋白免疫印迹、细胞增殖、细胞周期、细胞凋亡等实验研究SATB1的表达量的变化对F9细胞增殖、周期和凋亡的影响,研究结果如下:1.实时荧光定量PCR检测结果表明,F9细胞中SATB1有大量表达。用不同浓度(0mmol/L,1.5 mmol/L,2 mmol/L,2.5 mmol/L)的尼克酰胺处理F9细胞48 h,通过荧光定量PCR和蛋白免疫印迹检测处理后的F9细胞中SATB1的表达,处理后SATB1的表达量明显下调,且随着尼克酰胺浓度的增加,SATB1的表达量逐渐下降。随后,对用0mmol/L,1.5 mmol/L,2 mmol/L,2.5 mmol/L浓度的尼克酰胺处理48 h后的细胞,换成新鲜的不含尼克酰胺的培养液,36 h后收集细胞同样进行荧光定量PCR和蛋白免疫印迹检测SATB1的表达,发现SATB1的表达出现了明显的回升,说明尼克酰胺的作用下调了SATB1的表达。2.利用流式细胞仪检测了细胞周期和细胞凋亡。发现用0 mmol/L,1.5 mmol/L,2mmol/L,2.5 mmol/L浓度的尼克酰胺处理后大部分细胞被阻碍在G1期,细胞凋亡率也随着尼克酰胺浓度的增加出现了明显的升高。通过CCK-8试剂盒检测了细胞的增殖情况,发现,三个实验组细胞增殖在12 h和24 h变化不显现,但在36 h和48 h,细胞增殖出现了明显的抑制,但实验组和对照组相比,细胞增殖在12 h就明显的被抑制,说明尼克酰胺能抑制F9细胞的增殖并诱导F9细胞的凋亡。3.设计和构建了3对靶向小鼠SATB1的siRNA,并通过实验筛选出干扰效率最高的si-984。结果表明,干扰后的F9细胞表现出了与尼克酰胺处理后相似的特征,大部分细胞被阻滞在G1期,细胞凋亡率也出现了明显的升高,细胞的增殖受到明显的抑制,说明尼克酰胺是通过下调SATB1诱导了F9细胞的凋亡。总之,本研究首次发现尼克酰胺作为诱导因子能通过下调SATB1抑制F9细胞的增殖和诱导F9细胞的凋亡。这一结果对尼克酰胺在肿瘤的治疗应用上提供了重要的理论基础,也为肿瘤的治疗提供了一新思路。