紫杉醇抗药性的研究及细胞分化的研究

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第一部分:紫杉醇最早是从太平洋红豆杉中提取而出,其后通过体内外的研究发现紫杉醇可以有效的和β微管蛋白结合促进微管聚合,从而通过干扰纺锤体的形成将细胞有效的抑制在G2M期,进一步的引起细胞凋亡。由于紫杉醇具有引起细胞周期阻滞和细胞凋亡的能力,紫杉醇被广泛的用于癌症治疗,因此紫杉醇被用于肺癌,卵巢癌,乳腺癌,脑癌等癌症的治疗。不幸的是在紫杉醇的疗效因为肿瘤产生的抗药性而大大的影响到了疗效,为此我们希望发现新的紫杉醇抗药性的分子机理,我们通过将HeLa细胞长期于紫杉醇下处理,筛选到了一株紫杉醇抗性细胞-TRC30,因此得到一个新的紫杉醇抗性基因—TFAIP1, TNFAIP1在TRC30细胞中高表达,TNFAIP1的高表达是使TRC30获得紫杉醇抗性的原因,TNFAIP1可以与紫杉醇竞争性结合β微管蛋白从而减缓紫杉醇引起的微管聚合。同时我们亦报道了在紫杉醇处理时TNFAIP1的表达受转录因子SPl的调控,我们的研究发现了紫杉醇处理时SPl调控TNFAIP1表达使细胞获得紫杉醇抗性,提示了SP1-TNFAIP1信号通路,尤其是TNFAIP1将来可作为癌症治疗的新靶点。第二部分:细胞分化的概念是一个或一种类型的细胞通过增殖产生后代,而这些后代在形态结构以及生理功能上具有稳定性的差异。细胞分化是一种持久性的变化,不仅发生在胚胎发育中,而是在一生都进行着,以补充衰老和死亡的细胞。我们通过shRNA库筛选的方法,在干细胞R1中进行试验,并在RA处理与否情况下,通过生化和分子生物学方法检测干细胞的表型,筛选出Urdp1这个影响干细胞自我更新和分化的因子,并以这几个因子为靶点通过put down、免疫共沉淀等试验手段以及生物信息学等方法,寻找在细胞分化过程中与其相互作用的蛋白,从而研究其影响细胞分化的分子机制。
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