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流感病毒(influenza virus)一直困扰着人类，它每年造成季节性流感，新亚型的出现还可能引起爆发性全球大流行。自1997年香港首次发现H5N1禽流感病毒直接感染人类以来，已陆续发现有多个亚型禽流感病毒感染人类。2013年3月在我国首次出现H7N9禽流感病毒感染人，到2016年1月，中国共有698人感染，281人死亡，致死率达到40.3％约为2009年甲流的60倍。 接种疫苗是预防和控制流感最有效的方法。流感裂解疫苗通常采取肌肉注射的方法接种，然而这种策略主要提供系统性免疫应答。粘膜免疫不仅能诱导系统性免疫应答还能诱导局部粘膜免疫应答。然而，由于“异己”物质极易在粘膜腔道被降解或排除，疫苗的免疫原性会大大降低。添加佐剂可以改善粘膜免疫应答的效果。目前尚没有安全有效的粘膜佐剂应用于临床。在本研究中，我们探讨玉竹多糖（Polygonatum odoratun polysaccharide，POP）作为粘膜佐剂对H7N9流感病毒裂解疫苗的免疫增强效果。 以6-8周龄Balb/c小鼠为动物模型，采用单次滴鼻免疫的方法接种小鼠。首先探讨不同剂量（0.1、0.33、1和3μg）的H7N9流感裂解疫苗单独免疫（即不添加佐剂）对小鼠的粘膜免疫保护效果。根据该实验结果我们选择0.33μg疫苗剂量来考察POP的佐剂效果。将0.33μg裂解疫苗单独或添加不同剂量（400、600、800、1000和1200μg）的POP免疫小鼠，不免疫组和POP单独免疫组（采用最大剂量）小鼠作为对照。免疫3周后取小鼠血清和鼻洗液，用ELISA方法检测小鼠血清中的疫苗特异性IgG、IgG抗体亚类IgG1和IgG2a、鼻洗液中sIgA抗体滴度;用血凝抑制试验(HI)检测HI抗体滴度。免疫3周后（在取血后的第二天），用致死量(5LD50)同源病毒攻击小鼠，在攻毒后21内连续观察并记录小鼠的体重以及存活情况，并在攻毒3天后每组取3只小鼠，检测其肺洗液中的病毒滴度。通过上述指标评价POP对H7N9流感裂解疫苗经粘膜免疫的免疫增强效果。结果表明，抗体滴度（能检测到的）随佐剂剂量的增加有加强的趋势，但达到1200μg时，抗体滴度反而下降。当POP剂量为1000μg时，产生的各类抗体水平达到最大值，与未加佐剂的单独疫苗组比较有显著差异。IgG抗体亚类检测表明，与未添加佐剂组相比，添加佐剂组的IgG1抗体滴度均有增加，而IgG2a抗体滴度显著下降或只略有升高，1000μg剂量组的IgG1/IgG2a比值明显大于未添加佐剂组，说明POP是一种TH2型佐剂，诱导偏向Th2型的免疫应答。在保护效果方面，当POP剂量达到1000μg时保护效果最好，小鼠存活率达到75％，与疫苗单独免疫组和对照组（存活率均为0％）相比有显著差异。 本研究结果表明，POP能够增强H7N9流感裂解疫苗粘膜免疫的免疫保护效果，可以考虑作为粘膜佐剂做进一步的研究。