研究背景及目的：纯抗雌激素药物氟维司群（ICI182780，ICI）被用于治疗激素敏感性乳腺癌病人，可以与雌激素受体竞争性结合，亲和力与雌二醇相似；还可阻滞受体，抑制雌激素的结合，并激发受体发生形态改变，降低ER浓度而损害肿瘤细胞；可下调人体乳腺癌细胞中的ER蛋白，将 ER下调在肿瘤细胞内，使肿瘤的生长最小化。然而内分泌疗法经常出现固有或获得性耐药现象，尤其是癌症复发和转移，但其信号机制尚不明了。本研究旨在探讨E2和ICI是否增强细胞粘附及GPR30-ERK1/2-calpain信号通路在其中的介导作用，力图为探寻基于 GPR30信号通路的乳腺癌治疗手段以减少转移及提高抗雌激素治疗的疗效。　　方法：采用雌激素受体（ERα）/G蛋白偶联受体30（GPR30）阳性乳腺肿瘤细胞MCF-7为模型系统，ER阴性/GPR30阳性的SK-BR-3细胞作为对照。常规细胞培养，以E2、ICI或G1刺激模型细胞，通过蛋白印迹法观察蛋白质分子量变化；采用 GPR30抑制剂 G15或 CANP抑制剂 ALLN、Calpeptin预处理细胞，或siRNA转染沉默GPR30表达，观察GPR30、CANP在E2和ICI增强细胞粘附中的潜在作用。　　结果：（1）E2和ICI通过激活钙蛋白酶促进 MCF-7细胞与基质胶的粘附。我们使用了乳腺癌细胞系SK-BR-3（ERα-/GPR30+）作为对照。在E2或ICI的刺激下MCF-7细胞calpain1发生自身水解且细胞粘附能力增强；给予相同的刺激条件，SK-BR-3细胞中 calpain1和FAK蛋白的变化与 MCF-7细胞的反应类似。这些结果表明，E2和ICI增强细胞粘附和蛋白酶活化可能与 GPR30相关联。（2）E2和ICI可能触发 ERα/GPR30信号转换。当给予 E2（10 nM）或ICI（5μM）处理MCF-7细胞0~24h，ERα蛋白的表达下调，E2和ICI主要通过非基因调控途径引起 ERα蛋白的下调。然而，在 MCF-7和SK-BR-3细胞中给予 E2或 ICI后 GPR30表达几乎不受影响。此外，ER激动剂 DES不能诱导MCF-7细胞中钙蛋白酶1的自身水解（钙蛋白酶激活），但可增加calpain的表达，特别是 calpain2。(3)E2、ICI引起钙蛋白酶的激活和细胞黏附是通过GPR30实现的。以剂量依赖的方式给予 GPR30激动剂 G1，导致 calpain1的水解；GPR30特异性抑制剂 G15或 siRNA沉默 GPR30表达可显著抑制 E2，ICI或G1引起的calpain1的自身水解和细胞粘附。结果提示在MCF-7细胞中E2、ICI引起钙蛋白酶的激活和细胞粘附是通过 GPR30实现的。(4)ERK1/2是 E2和ICI刺激 GPR30和钙蛋白酶的信号通路。E2或 ICI在两种细胞中可时间依赖性地引起细胞外信号激活蛋白激酶（ERK1/2）磷酸化水平上调，ERK1/2抑制剂U0126能明显抑制钙蛋白酶的激活和ERK1/2磷酸化。这些结果表明，ERK1/2是E2或ICI诱导GPR30-Calpain通路的上游信号分子。（5）在E2和ICI增强细胞-基质胶的粘附过程中钙蛋白酶是必需条件。我们使用了两种蛋白酶抑制剂ALLN和calpeptin，预处理细胞，再给予 E2或 ICI刺激。无论是 ALLN或calpeptin都会明显抑制E2或ICI诱导的细胞粘附，这表明钙蛋白酶参与GPR30介导的细胞粘附的过程。　　结论：（1）E2和ICI均可促进 MCF-7细胞基质胶的粘附；（2）E2和ICI可能通过触发 ERα/GPR30转换发挥其生物学作用；（3）E2和ICI促进细胞粘附是通过GPR30-ERK1/2-钙蛋白酶途径实现的。