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目的:1.本文旨在探讨肾癌组织甲基化转移酶3A(DNMT3A)表达与肾透明细胞癌患者临床病理关系以及肿瘤复发及转移的关系。2.通过过表达DNMT3A等方法,在细胞株786-o中,探讨DNMT3A表达变化与依维莫司耐药的关系,并初步探讨DNMT3A的表达对细胞凋亡及生长相关蛋白Erk1/2、Bcl-2等的调控机制。方法:收集2015年1月至2017年12月共58例肾癌患者癌组织及癌旁组织标本,均为术后病理确诊为肾透明细胞癌,所有病例均来自厦门大学附属第一医院泌尿外科。将收集的临床标本运用qRT-PCR(quantitative Real-time PCR,实时荧光定量PCR)检测DNMT3A基因表达水平。将测得的PCR值结合患者临床病理参数进行统计学分析,明确肾细胞癌患者癌组织DNMT3A表达与肾细胞癌患者临床病理的关系;通过转染DNMT3A过表达质粒及依维莫司药物处理786-o细胞,从分子细胞生物学水平阐述DNMT3A促进肾癌细胞增殖的机制及依维莫司耐受的可能信号机制。结果:1、qPCR方法检测我科58例肾透明细胞癌病人癌旁及癌组织DNMT3A表达量,结果显示:肾癌组织DNMT3A表达水平显著高于肾细胞癌癌旁组织(P<0.05),并且DNMT3A表达水平与肾透明细胞癌病理分级、病理TNM分期及肿瘤最大径具有显著的相关性(P<0.05),而与性别、年龄、BMI未见明显差异(P>0.05),表明肾癌组织DNMT3A表达量及肿瘤病理分级与肾癌复发转移相关(p<0.05)。2、肾癌细胞株786-0中过表达DNMT3A后,发现与肿瘤生长相关的P-ERK1/2蛋白表达量升高,5μM的依维莫司处理后P-ERK1/2升高更明显(P<0.05);CCK8试验表明转染过表达质粒后,增殖水平显著高于对照组增殖水平,且依维莫司处理后更明显(P<0.01);单克隆形成实验证明过表达DNMT3A后,依维莫司处理后的DNMT3A质粒转染组细胞集落形成明显高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:1、肾癌组织DNMT3A表达量明显高于癌旁组织;DNMT3A表达与肾癌临床病理特征关系密切,高表达DNMT3A的肾透明细胞癌倾向更差的病理分级。2、过表达DNMT3A能够提高肾癌细胞株786-o的增殖能力;依维莫司处理条件下,肾癌细胞可以通过DNMT3A的表达介导下游ERK1/2的反馈激活,促进肾癌细胞的耐药性,相关机制的阐明为肾癌的治疗提供新的靶点与治疗策略。