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农药的广泛使用对人体健康造成了危害,越来越严格的农药残留限量值也给农药残留检测的灵敏度提出了更高的要求。本论文将分子印迹技术应用于免疫分析当中,建立了一种仿生酶联免疫测定法,用来测定环境样品中的苯磺隆残留。实验以苯磺隆为模板分子,甲基丙烯酸为功能单体,乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂,采用本体聚合法在96孔酶标板上直接合成了对苯磺隆具有高选择识别能力的分子印迹聚合物膜。在对聚合物膜的合成条件进行优化之后,通过傅立叶红外光谱分析、平衡结合实验和吸附动力学实验,对分子印迹膜的性能进行了表征。实验结果表明,苯磺隆分子印迹聚合物膜具有较高的特异性和较快的传质速度。在相同的实验条件下,印迹聚合物膜的饱和吸附容量最高可达到非印迹聚合物膜饱和吸附容量的1.28倍。在苯磺隆浓度为15μg L-1时,吸附10min可达到最大吸附容量的64.8%,吸附40min能达到最大吸附容量的96.2%,吸附60min就能基本达到平衡。将所制备的分子印迹膜作为仿生抗体应用于免疫分析中,建立了直接竞争仿生酶联免疫分析方法。在最适条件下,所建立仿生酶联免疫方法的灵敏度即IC50为15.77μgL-1,最低检出限即IC15为0.01μgL-1。同时,该方法对苯磺隆具有较高的选择性,对苯磺隆的三种结构类似物的交叉反应率为3.17%-13.10%。为了验证方法的可行性,将该方法用于水样和土样的苯磺隆添加回收实验,得到水样中的回收率为93.6%-96.8%,土样中的回收率为87.5%-97.5%。用高效液相色谱法验证所建立ELISA方法的准确性,得到两种方法对水样和土样中回收率测定的相关系数分别为0.9923和0.9877,说明所建立的分子印迹仿生酶联免疫方法适于痕量苯磺隆的快速检测。