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五指山位于海南岛中部,北纬18045’20"-18°58’54",东经109°39’38"~109°47’50",主峰位于五指山市境内,最高峰海拔高度1867米,属国家自然保护区的而积134.4平方公里,为海南最大的自然保护区,是世界上现存地势最高的原始热带雨林之一,蕴藏着极其丰富的链霉菌资源,至今仍然未開发利用(周成萍,2007)。本文对五指山原始林区不同海拔高度和不同植被生境土壤样品中的链霉菌进行了分离、初步鉴,并以香蕉黑星病菌(Macrophoma musae)为对象进行了分离菌株的生防作用初步评价,旨在发现链霉菌新种,获得对香蕉黑星病具有良好生防潜力的链霉菌菌株和新型高效抗生素产生菌株。初步研究结果如下:一、采用稀释平板法,主要选取土壤浸汁、高氏一号、葡萄糖天门冬素三种选择性培养基(每种培养基上均加有50μg/mL的重铬酸钾、50μg/mL放线菌酮及50μg/mL的制霉菌素),结合湿热、碳酸钙富集和苯酚三种不同的预处理方法,共从五指山原始林区不同海拔高度不同生境的116份土样中分离得到856株链霉菌,其中以碳酸钙富集预处理后再涂布于葡萄糖天门冬素琼脂上分离得到的链霉菌最多。二、根据气生菌丝颜色、基内菌丝颜色和可溶性色素的有无将856株链霉菌划分为12个类群,其中自孢类群72株,黄色类群82株,粉红孢类群36株,淡紫灰类群18株,灰红紫类群27株,青色类群9株,绿色类群22株,蓝色类群21株,金色类群59株,吸水类群12株,灰褐类群273株和烬灰类群225株。其中以灰褐类群和烬灰类群为优势类群。三、从上述12个类群中挑选33株代表菌株进行了形态观察和16SrRNA基因序列分析,均属于链霉菌属,并对其中的13株链霉菌进行了初步鉴定,将其鉴定为13个种,分别为Streptomyces murinus、Streptomyces alboniger、Streptomyces sanglieri、Streptomyces tosaensis、Streptomyces chromofuscus、Streptomyces nodosus、Streptomyces ribosidificus、Streptomyces roseochromogenus subsp、Streptomyces hygroscopicus、Streptomyces miharaensis、Streptomyces mucoflavus、Streptomyces bungoensis和Streptomyces geysiriensis。四、对不同海拔高度分离到的链霉菌数量进行统计分析,发现链霉菌的数量随海拔高度的升高而降低;并且发现不同生境土壤样品中分离得到链霉菌的数量也很不相同。五、采用平板对峙法,以香蕉黑星菌为抑制对象,对856株链霉菌菌进行抑菌活性初步测定,筛选出对香蕉黑星菌具有较强抑菌活性的菌株36株,其中以WZ1-5019菌株的抑菌活性最强,抑菌距离达18mm。并用WZ1-5019菌株发酵液进行香蕉黑星病田间防治试验,结果表明,施用WZ1-5019菌株发酵液3次后,对香蕉黑星病的平均防治效果达81.68%,显著优于30%爱苗乳油1500倍液防效(59.96%)和10%世高水分散粒剂1500倍液防效(53.58%),为香蕉黑星病生物防治的研究与应用奠定了一定基础。六、对拮抗菌WZ1-5019进行分类鉴定,通过16SrDNA序列分析发现与Streptomyces costaricanus、Streptomyces griseofuscus、Streptomyces murinus、Streptomyces graminearus亲缘关系都很近;再通过培养特征、形态特征及生理生化等多项特征与其相关近缘种属比较,最终将其鉴定为链霉菌属中的Streptomyces costaricanus。七、在对菌株WZ1-7219的初步鉴定中,发现其16SrDNA序列相似性与Streptomyces alboniger和Streptomyces curacoi最高,为95.028%,但在进化树上与Streptomyces alboniger和Streptomyces curacoi处在不同分支上,菌株WZ1-7219单独形成一个稳定的分枝;其形态特征与Streptomyces curacoi较为相似,而与Streptomyces alboniger存在一定差距;其培养特征及生理生化特性与Streptomyces alboniger和Streptomyces curacoi都存在一定的差异。因此,菌株WZ1-7219极有可能是Streptomyces属中的一个新种。