NMDA受体是由NR1和NR2亚单位组成的异聚体复合物，亚单位之间的装配对于NMDA受体通道的形成和表面表达至关重要。以往的研究提示，NR2亚单位胞内C末端区可能参与调节NMDA受体的表面表达和突触定位。 本研究的第一部分通过一系列C末端截短的NR2A亚单位突变体的构建以及NMDA受体膜表面表达和功能的检测，在HEK293细胞和培养海马神经元研究了NR2A亚单位的C末端在NMDA受体装配和表面表达中的作用。结果发现，当NR2A亚单位的C末端截短后其TM4下游分别剩下59、5、3个氨基酸残基时(2A△59、2A△5和2A△3)，它们均能与NR1-1a形成有功能的受体通道并表达于细胞膜表面，但是与未截短的NR2A相比其表面表达均有所下降；并且，当2A△5的TM4下游仅存的5个氨基酸EHLFY突变成EAAAA(2A△5EAAAA)时，仍可与NR1-1a形成受体复合物并表达于细胞膜表面。若将NR2A的C末端截短仅保留TM4后的1个氨基酸时(2A△1)，该突变体与NR1-1a共转染时，就不再获得受体复合物的细胞膜表面表达，也不能记录到谷氨酸诱发的电流。有趣的是，当NR1-4a与2A△1共转染时，NR1-4a/2A△1受体复合物仍然能表达于HEK293细胞表面，并能检测到通道功能。在此，与NR1-1a不同的是NR1-4a不含有内质网滞留基序列。以上结果提示，NR2A亚单位TM4后的3个氨基酸是NR1-1a/NR2A受体复合物细胞膜表面表达所必需的，然而，NR2A亚单位的C末端并不是NR2A与NR1装配和形成功能性通道所必需的，但能帮助NR1-1a克服内质网滞留作用使NMDA受体复合物表达于细胞膜表面。 本研究的第二部分研究了NR2A亚单位单独转染时膜表面表达。以往研究表明，在异源细胞单独转染NR2A亚单位不能获得细胞膜表面表达，也不能检测到有功能的受体通道，NR2A必须与NR1形成异聚体，才能形成有功能的受体通道。我们用GFP-NR2A单独转染HEK293细胞，经200nMPMA(PKC激动剂)孵育30min后，用抗GFP抗体做活细胞表面染色，结果发现4.1±1.5％转染细胞(表达有绿色荧光蛋白)表面染色阳性，即GFP-NR2A获得了细胞膜表面表达，而未经PMA处理的转染细胞则无阳性染色，提示PKC的激活可以促进NR2A向细胞膜的运输。我们进一步通过转染C末端部分缺失的NR2A，证明了NR2A亚单位的C末端1149D-1464V区域可能介导了这一作用。然而，表面表达有NR2A的HEK293细胞采用全细胞膜片钳法并未能记录到谷氨酸诱发的电流，也尚不能确认表面表达的NR2A亚单位是单体形式还是同聚体。 本研究的第三部分，我们研究了PSD95对NR2A膜转运的影响。结果发现当GFP-PSD95与NR2A共表达于HEK293细胞时，部分转染细胞(13.2±3.1％)的胞浆中具有一些GFP-PSD95和NR2A高密度且共定位的区域，这些区域同时也能被高尔基体特异性染料(GolgiTracker)和早期内体抗体EEA1所标记，提示可能是相应的亚细胞器。而且，经1mMPMA孵育后含有这种GFP-PSD95和NR2A高密度共定位区的细胞比例显著增加(35.2±0.2％)。当将C末端缺失的2A△1和PSD95共转染时，就不再能观察到NR2A和PSD95的这种高密度共定位区，用PMA也不能诱导出这种分布。提示含NR2A亚单位的NMDA受体的膜运输可能在早期就受到细胞支架蛋白PSD95和PKC介导的磷酸化的调节。