目的:研究补肾解毒方全方、拆方、单方水煎干浸膏对Con A诱导的小鼠免疫性肝损伤模型的作用;研究上述药物对人肝LO2细胞和脾细胞增殖的调节作用;研究上述药物小鼠原代脾淋巴细胞与腹腔巨噬细胞细胞因子表达的影响。以期阐释补肾解毒方治疗慢性肝损伤的作用机制。方法:1.建立昆明种小鼠Con A诱导的免疫性肝损伤模型;2.补肾解毒方干预Con A模型小鼠,通过HE法观察肝脏组织病理,生化法检测血清ALT、AST水平和肝匀浆上清中的SOD、MDA、CAT水平,ELISA法检测脾细胞上清中的IFN-γ水平,研究补肾解毒方对肝损伤的保护作用;3.补肾解毒方对人肝LO2细胞进行干预,MTT法检测其增殖能力,研究补肾解毒方对肝细胞增殖的调节作用;4.补肾解毒方对小鼠原代脾细胞和腹腔巨噬细胞进行干预,MTT法检测脾细胞增殖,ELISA法检测脾淋巴细胞上清中的IFN-γ水平和腹腔巨噬细胞上清中的TNF-α水平,研究补肾解毒方对免疫细胞的调控作用。结果:1.补肾解毒方对小鼠免疫性肝损伤的保护作用:(1)中药对小鼠脏器系数的影响:与正常组比较,模型组小鼠肝脏系数显著升高(P<0.05),胸腺系数降低(P>0.05);与模型组比较,全方、活血解毒拆方与醋青皮组的肝脏指数显著降低升高(P<0.05);(2)中药对模型小鼠肝脏病理的改变:与正常组比较,模型组小鼠病理切片显示明显的肝细胞坏死区域并伴有大量炎症细胞聚集和纤维细胞的增生;与模型组比较,用药组肝细胞坏死区域缩小,炎症细胞聚集减少,出现双核或多核肝细胞;(3)中药对小鼠肝功能的调节作用:与正常组比较,模型组小鼠血清ALT、AST水平明显升高(P<0.05);与模型组比较,活血解毒拆方组小鼠血清AST水平降低(P<0.01),巴戟天、淫羊藿和苦参组的小鼠血清ALT水平降低(P<0.05);(4)中药对小鼠肝脏内抗氧化能力指标表达的影响:与正常组比较,模型组小鼠肝匀浆上清中的SOD与CAT酶活力降低(P>0.05);与模型组相比,苦参、丹参、猫爪草、醋青皮组肝匀浆上清的SOD酶活力提高(P<0.05);(5)中药对小鼠脾淋巴细胞IFN-γ表达水平的影响:与正常组相比,模型组小鼠脾淋巴细胞IFN-γ表达水平升高(P<0.001);与模型组相比,全方一组、补肾拆方组、巴戟天和苦参组的小鼠IFN-γ的表达水平降低(P<0.05);2.补肾解毒方对人肝LO2细胞增殖的调节作用:(1)全方和三种拆方在10、50、100和250μg/m L有明显促增殖活性(P<0.05),且呈良好的量效关系;(2)淫羊藿、地黄、灵芝250μg/m L有促增殖作用(P<0.05),丹参和醋青皮50、100和250μg/m L均有促增值作用(P<0.05);(3)全方在50、100和250μg/m L对H2O2抑制肝细胞增殖有明显的调节作用(P<0.05),且呈良好量效关系;(4)补肾拆方和活血解毒拆方在250μg/m L对H2O2抑制肝细胞增殖有明显的调节作用(P<0.05);50μg/m L丹参与100、250μg/m L醋青皮对H2O2抑制肝细胞增殖有明显的调节作用(P<0.05);3.补肾解毒方对免疫细胞的调控作用:(1)全方和三个拆方水煎干浸膏对小鼠原代脾细胞均无明显增殖作用,对Con A刺激和LPS刺激的脾细胞增殖有拮抗作用(P<0.05);(2)全方对小鼠原代脾细胞IFN-γ表达水平无影响,但可以降低腹腔巨噬细胞TNF-α的表达水平(P>0.05);(3)补肾拆方、健脾拆方、活血解毒拆方在250μg/m L升高脾细胞IFN-γ的表达水平(P<0.05),50μg/m L补肾拆方、10μg/m L健脾拆方与活血解毒拆方降低腹腔巨噬细胞TNF-α的表达水平(P<0.05)。结论:1.补肾解毒方主要通过降低血清转氨酶水平和升高肝脏SOD酶活力对免疫性肝损伤小鼠有治疗作用,并且全方效果优于拆方与单方。2.补肾解毒方的全方、补肾拆方、健脾拆方、活血解毒拆方、淫羊藿、地黄、灵芝、丹参和醋青皮促进肝细胞的增殖,抑制H2O2诱导的肝细胞的氧化损伤和凋亡。3.补肾解毒方调节小鼠原代脾细胞和腹腔巨噬细胞的免疫作用。