【摘 要】
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目的:在课题组前期研究的基础上继续探讨沉默hnRNP A2/B1基因后对人宫颈癌Hela及CaSki细胞中PI3K/AKT通路中相关蛋白及裸鼠移植瘤生长的影响。方法:慢病毒载体介导shRNA沉默
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目的:在课题组前期研究的基础上继续探讨沉默hnRNP A2/B1基因后对人宫颈癌Hela及CaSki细胞中PI3K/AKT通路中相关蛋白及裸鼠移植瘤生长的影响。方法:慢病毒载体介导shRNA沉默宫颈癌细胞中的hnRNP A2/B1基因的细胞株由课题组前期制备;Western blot实验用来检测PI3K、AKT、p-AKT、p21、p27、caspase-3、Cleaved caspase-3蛋白的表达。MTT和划痕实验用来评估各组细胞在加入通路抑制剂LY294002和激活剂IGF-1后的变化。运用Hela细胞来建立裸鼠移植瘤模型,免疫组化法检测移植瘤组织中PCNA和Ki-67的表达,苏木精伊红染色(H&E)验证肿瘤细胞形态。结果:细胞水平及裸鼠移植瘤中Western blot结果均显示hnRNP A2/B1的沉默组中PI3K/AKT信号通路中的相关蛋白p21、p27和cleaved caspase-3的表达明显上调,且p-AKT的表达均降低(P<0.05)。MTT和划痕实验显示各组细胞中的PI3K/AKT信号通路均可分别被LY294002和IGF-1抑制及激活。免疫组化结果显示,PCNA和Ki-67在裸鼠体内明显下调(P<0.05),同时,hnRNP A2/B1基因沉默对裸鼠移植瘤的生长有明显的抑制作用。结论:抑制hnRNP A2/B1在宫颈癌细胞中可能通过PI3K/AKT信号通路抑制细胞增殖和迁移,并能抑制肿瘤的生长。
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