重组人生长激素对狭长窄蒂皮瓣成活影响的实验研究

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目的:通过重组人生长激素(rhGH)干预成年SD大鼠皮瓣成活,并采用全身注射和皮瓣局部注射两种不同用药方法,观察rhGH及其不同用药方法对狭长窄蒂皮瓣成活面积的影响程度,并初步探讨rhGH促进皮瓣成活的机制。方法:80只健康成年SD大鼠,随机选取大鼠背部一侧制作一个狭长窄蒂任意型皮瓣模型,皮瓣蒂部距背部中线约1cm,蒂部长宽为1.0cm×1.0cm,携带的圆形瓣部直径约2.5cm。采用随机、开放、安慰剂的实验方法,将狭长窄蒂皮瓣制作完成后的80只大鼠随机均分为皮瓣局部用药的Ⅰ组和全身用药的Ⅱ组,两大组又分别分为实验组(a组)和对照组(b组),每组各20只。Ⅰa组术后即刻开始连续7d皮瓣局部皮下注射重组人生长激素0.1IU/Kg·d;Ⅰb组术后即刻开始连续7d皮瓣局部皮下注射等量生理盐水;Ⅱa组术后即刻开始连续7d全身注射重组人生长激素0.1IU/Kg·d(远离皮瓣);Ⅱb术后即刻开始连续7d全身注射等量生理盐水(远离皮瓣)。术后对四组大鼠的皮瓣进行大体观察,术后第7d计算皮瓣成活面积。四组均于术后0d、3d、5d、7d取皮瓣远端采集标本,用免疫组织化学法及ELISA法检测bFGF、CD34的表达情况;光镜下皮瓣组织常规HE染色观察;计算皮瓣微血管密度。结果:(1)术后第7d,Ⅰa、Ⅰb、Ⅱa、Ⅱb组皮瓣成活面积百分比分别为(100±0.00)%、(72±3.10)%、(84±2.43)%、(73±2.50)%,Ⅰa、Ⅱa组均明显大于Ⅰb、Ⅱb组,Ⅰa组明显高于Ⅱa组,P<0.05;Ⅰb组和Ⅱb组比较无明显差异。(2)同一组狭长窄蒂皮瓣,随着时间推移,bFGF、CD34的表达及MVD随之增加。Ⅰa、Ⅱa组bFGF、CD34在第3d达最高值(Ⅰa组分别为1531.8±9.8、45.74±0.55,Ⅱa组分别为1041.2±9.5、35.04±0.44),Ⅰb、Ⅱb组bFGF、CD34在第5d达最高值(Ⅰb组分别为840.9±8.8、21.13±0.42;Ⅱb组分别为861.4±11.0、20.78±0.25);四组的MVD值在第7d最高(Ⅰa组67.91±3.86,Ⅰb组35.51±4.87,Ⅱa组46.71±3.76,Ⅱb组34.78±5.61);(3)不同组狭长窄蒂皮瓣,相同时间点比较bFGF、CD34表达及MVD,Ⅰa、Ⅱa组均明显高于Ⅰb、Ⅱb组,Ⅰa组明显高于Ⅱa组,P<0.05;Ⅰb组和Ⅱb组比较无明显差异。HE染色观察组织,术后四组微血管数均增加Ⅰa、Ⅱa组均明显高于Ⅰb、Ⅱb组,Ⅰa组明显高于Ⅱa组,Ⅰb组和Ⅱb组比较无明显差异。结论:(1)狭长窄蒂皮瓣经注射重组人生长激素可促使其组织中bFGF、CD34的表达增加,并能促进皮瓣组织中血管新生;(2)狭长窄蒂皮瓣经注射重组人生长激素可提高皮瓣的成活率;(3)狭长窄蒂皮瓣皮瓣局部皮下注射重组人生长激素比全身注射重组人生长激素能更好的促进皮瓣成活;
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